基于GC-MS和UPLC-MS技術(shù)的急性肝衰竭的代謝組學(xué)分析.pdf

1、目的：
　　探索急性肝衰竭發(fā)生發(fā)展直至死亡過程中血清代謝物的動(dòng)態(tài)變化，了解肝衰竭的病理過程，尋找潛在的標(biāo)志物。
　　方法：
　　用D-半乳糖胺對(duì)10只巴馬香豬（1.3g/kg）行急性肝衰竭造模，分別在給藥前(0h)、給藥后12h、24h、36h和48h抽取豬的血樣進(jìn)行生化分析，離心后的血清分別用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)和超高液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行(UPLC-MS)檢測(cè).原始數(shù)據(jù)分別用R軟件和MassLynx軟件

2、處理，得到的三維表格導(dǎo)進(jìn)SIMCA-P+12.0軟件進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析，根據(jù)VIP和得分圖篩選在肝衰竭整個(gè)過程中明顯變化的代謝物，并分析這些物質(zhì)的變化趨勢(shì)。
　　結(jié)果：
　　急性肝衰竭小豬的生存時(shí)間:53.4±3.41 h;臨床生化指標(biāo)和病理HE染色證實(shí)肝衰竭模型成功。GC-MS分析后總離子圖的重合度良好，UPLC-MS的所有樣本主成分分析顯示QC樣本緊密結(jié)合在一起，說明儀器穩(wěn)定和重復(fù)性良好，保證代謝數(shù)據(jù)的可靠性。正交偏最小方

3、差判別分析(OPLS-DA)結(jié)果顯示:健康組和造模后的其他組明顯分開，而且肝衰竭沿著時(shí)間軌跡的整個(gè)變化過程可以在代謝水平體現(xiàn)出來。根據(jù)VIP和S-plot結(jié)果鑒定出的明顯變化的代謝物有氨基酸類;膽汁酸類;溶血亂磷脂酰膽堿類(LPC)和磷脂酰膽堿類(PC)。這些物質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化與肝衰竭的整個(gè)病理過程相關(guān)，可作為潛在的標(biāo)志物。
　　結(jié)論：
　　運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)急性肝衰竭發(fā)生發(fā)展中存在4類代謝物的動(dòng)態(tài)變化并且有獨(dú)特的臨床意義