臭氧對膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎滑膜IL24與CXCL13的影響.pdf

1、目的：觀察醫(yī)用臭氧對膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎滑膜IL24與CXCL13表達的影響，探討臭氧是否通過影響滑膜組織中IL24與CXCL13表達起到治療骨關(guān)節(jié)炎的作用，為醫(yī)用臭氧治療膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎提供更多臨床依據(jù)。
　　方法：根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)選擇骨關(guān)節(jié)炎患者的滑模標(biāo)本，隨機抽簽分為臭氧聯(lián)合關(guān)節(jié)鏡組和單純關(guān)節(jié)鏡組，其中臭氧聯(lián)合關(guān)節(jié)鏡組關(guān)節(jié)鏡手術(shù)后關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射40μg/ml濃度醫(yī)用臭氧40ml/周，共兩周；單純關(guān)節(jié)鏡組患者術(shù)后不注射臭氧，術(shù)后第

2、6個月再次進行手術(shù)獲取檢測標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)法、反轉(zhuǎn)錄PCR法、蛋白印跡法比較兩組關(guān)節(jié)滑膜治療前后IL24與CXCL13表達的差異；為驗證臭氧對滑膜炎癥確有治療效果，進一步培養(yǎng)人正?；ぜ毎⑼ㄟ^致炎性細胞因子TNF-α刺激建立滑膜細胞炎癥模型，使用臭氧化的PBS緩沖液浸洗細胞炎癥模型模擬臨床臭氧治療過程，采用免疫細胞化學(xué)法、反轉(zhuǎn)錄PCR法、蛋白印跡法比較兩組滑膜細胞臭氧處理前后IL24與CXCL13表達的差異。
　　結(jié)果：⑴

3、膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎患者滑膜組織IL24與CXCL13表達量與病情嚴重程度呈負相關(guān)：兩組患者共55例（失訪1例）60膝，對治療前關(guān)節(jié)滑膜組織進行IL24與CXCL13的RT-PCR檢測，結(jié)果顯示隨病情加重其mRNA表達量明顯降低，免疫組化和蛋白印跡法檢測蛋白表達變化趨勢與PCR結(jié)果一致。⑵治療后滑膜組織IL24與CXCL13表達水平上升：兩組患者經(jīng)治療后采用反轉(zhuǎn)錄PCR、免疫組化和蛋白印跡法檢測其滑膜組織IL24與CXCL13表達量，結(jié)果顯示

4、治療后兩組患者滑膜中IL24與CXCL13表達量均有不同程度的回升，且臭氧聯(lián)合關(guān)節(jié)鏡組回升程度較單純關(guān)節(jié)鏡組顯著，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。⑶人正?；ぜ毎装Y模型建立：通過TNF-α刺激人正?；ぜ毎⒂肊LISA法檢測細胞培養(yǎng)液中IL1β和IL10含量和在顯微鏡下動態(tài)觀察細胞生長狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)300ng/mL濃度的TNF-α顯示較好的致炎作用，細胞培養(yǎng)液中IL1β和IL10的含量隨TNF-α刺激時間延長而增多，說明滑膜細胞炎癥模型成功建立。⑷人

5、正?；ぜ毎装Y模型中IL24與CXCL13表達量高于正常細胞：通過TNF-α刺激人正?；ぜ毎蟛捎梅崔D(zhuǎn)錄PCR、免疫細胞化學(xué)和蛋白印跡法檢測滑膜細胞IL24與CXCL13表達量，結(jié)果顯示300ng/mL濃度下IL24與CXCL13表達量隨TNF-α刺激時間延長而升高，與正常滑膜細胞相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義。⑸臭氧化PBS緩沖液浸洗滑膜細胞炎癥模型后IL24與CXCL13表達量降低：臭氧化的PBS浸洗滑膜細胞炎癥模型后采用反轉(zhuǎn)錄PCR、免

6、疫細胞化學(xué)和蛋白印跡法檢測滑膜細胞IL24與CXCL13表達量，結(jié)果顯示處理后的表達量較處理前有明顯降低，與用普通PBS浸洗的滑膜細胞炎癥模型組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：①醫(yī)用臭氧對膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎有較好的臨床治療效果，能夠減輕骨關(guān)節(jié)炎癥狀，延緩滑膜炎的進展，但不能完全停止和逆轉(zhuǎn)骨關(guān)節(jié)炎病程進展。②醫(yī)用臭氧可以通過改變IL24與CXCL13表達達到治療膝關(guān)節(jié)滑膜炎的作用。③醫(yī)用臭氧聯(lián)合關(guān)節(jié)鏡治療骨關(guān)節(jié)炎較單純關(guān)節(jié)鏡清理術(shù)效果