多囊卵巢綜合征大鼠模型CARM1及其產(chǎn)物表達(dá)研究.pdf

1、多囊卵巢綜合征的臨床特點(diǎn)在不同個(gè)體之間存在很大差異，目前公認(rèn)的共同病理生理過程主要有①持續(xù)性排卵功能障礙，與體內(nèi)激素代謝紊亂有關(guān)；②胰島素抵抗，與內(nèi)皮功能損傷有關(guān)；③高雄激素血癥。最終所導(dǎo)致的不孕、月經(jīng)紊亂、激素代謝異常、心血管遠(yuǎn)期并發(fā)癥等一系列癥狀影響女性的一生。雖然PCOS目前針對(duì)以上三大病理生理過程分別有相對(duì)應(yīng)的治療方案，但此三大病理生理特點(diǎn)作為相對(duì)獨(dú)立的存在，一直缺乏一個(gè)能將他們聯(lián)系到一起的因子。
　　近年來發(fā)現(xiàn)的與多種激

2、素依賴性腫瘤有密切聯(lián)系的輔激活因子相關(guān)的精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1及其產(chǎn)物非對(duì)稱性二甲基精氨酸某些途徑的調(diào)節(jié)作用，參與一些以內(nèi)皮功能損傷為基礎(chǔ)的全身代謝性疾病的發(fā)生。
　　本實(shí)驗(yàn)通過皮下注射外源性雄激素去氫表雄酮建立大鼠PCOS模型的方法，研究輔激活因子相關(guān)的精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1及其產(chǎn)物非對(duì)稱性二甲基精氨酸在模型中的變化及其與雄激素受體的相關(guān)性，初步探PCOS三大病理生理過程之間的內(nèi)在聯(lián)系。
　　第一部分、外源性雄激素多囊卵巢綜合征模

3、型構(gòu)建
　　目的：檢測(cè)外源性雄激素DHEA構(gòu)建PCOS模型的穩(wěn)定性，探討外源性雄激素PCOS模型的特點(diǎn)。
　　方法：將40只雌性SD大鼠（21日齡）按照簡單隨機(jī)化分組法分為實(shí)驗(yàn)組（n=20）和對(duì)照組（n=20），實(shí)驗(yàn)組每日頭頸部皮下按每100g體重注入DHEA6mg，對(duì)照組同位置注入等量注射用油。連續(xù)20日后觀察大鼠卵巢組織學(xué)及大體形態(tài)、體重、性激素變化。
　　結(jié)果：兩組外觀及一般行為未見明顯異常且無明顯差異；PCOS

4、實(shí)驗(yàn)組最終體重、增加體重、卵巢重量及相對(duì)重量均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；實(shí)驗(yàn)組血清睪酮、雌二醇、促黃體生成素均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），孕酮、促卵泡生長素及LH/FSH比值與對(duì)照組之間相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；實(shí)驗(yàn)組卵巢解剖大體形態(tài)較蒼白且出現(xiàn)多個(gè)擴(kuò)張囊泡并含囊泡液，HE染色鏡下出現(xiàn)大量閉鎖卵泡、囊狀卵泡，顆粒細(xì)胞層減少，卵母細(xì)胞消失等。對(duì)照組卵巢組織大體外觀色澤較紅潤，鏡下見多個(gè)黃體及不同發(fā)育階段的卵泡，卵

5、泡內(nèi)顆粒細(xì)胞層數(shù)增多。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)采用的外源性雄激素 DHEA皮下注射建模方法穩(wěn)定有效，符合臨床PCOS疾病癥狀特點(diǎn)，適用于多種與PCOS有關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究。
　　第二部分、模型中AR與CARM1及產(chǎn)物相關(guān)表達(dá)研究
　　目的：檢測(cè)該P(yáng)COS模型中AR與CARM1的表達(dá)情況，研究模型中胰島素抵抗、激素改變、AR與CARM1及其產(chǎn)物ADMA之間的關(guān)系。
　　方法：取第一部分實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠血清，ELISA法檢測(cè)血

6、清中ADMA、空腹胰島素；取尾血檢測(cè)空腹血糖，計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA值）評(píng)價(jià)胰島素抵抗情況；免疫組化確定CARM1在卵巢組織中的表達(dá)情況，Western Blot及熒光定量PCR檢測(cè)卵巢AR、CARM1蛋白及mRNA轉(zhuǎn)錄表達(dá)情況。
　　結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組血清空腹血糖、胰島素、HOMA值、ADMA均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；卵巢組織中的CARM1主要由顆粒細(xì)胞表達(dá)；AR、CARM1蛋白量及mRNA表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P