多囊卵巢綜合征大鼠模型CARM1及其產(chǎn)物表達研究.pdf

1、多囊卵巢綜合征的臨床特點在不同個體之間存在很大差異，目前公認的共同病理生理過程主要有①持續(xù)性排卵功能障礙，與體內激素代謝紊亂有關；②胰島素抵抗，與內皮功能損傷有關；③高雄激素血癥。最終所導致的不孕、月經(jīng)紊亂、激素代謝異常、心血管遠期并發(fā)癥等一系列癥狀影響女性的一生。雖然PCOS目前針對以上三大病理生理過程分別有相對應的治療方案，但此三大病理生理特點作為相對獨立的存在，一直缺乏一個能將他們聯(lián)系到一起的因子。
　　近年來發(fā)現(xiàn)的與多種激

2、素依賴性腫瘤有密切聯(lián)系的輔激活因子相關的精氨酸甲基轉移酶1及其產(chǎn)物非對稱性二甲基精氨酸某些途徑的調節(jié)作用，參與一些以內皮功能損傷為基礎的全身代謝性疾病的發(fā)生。
　　本實驗通過皮下注射外源性雄激素去氫表雄酮建立大鼠PCOS模型的方法，研究輔激活因子相關的精氨酸甲基轉移酶1及其產(chǎn)物非對稱性二甲基精氨酸在模型中的變化及其與雄激素受體的相關性，初步探PCOS三大病理生理過程之間的內在聯(lián)系。
　　第一部分、外源性雄激素多囊卵巢綜合征模

3、型構建
　　目的：檢測外源性雄激素DHEA構建PCOS模型的穩(wěn)定性，探討外源性雄激素PCOS模型的特點。
　　方法：將40只雌性SD大鼠（21日齡）按照簡單隨機化分組法分為實驗組（n=20）和對照組（n=20），實驗組每日頭頸部皮下按每100g體重注入DHEA6mg，對照組同位置注入等量注射用油。連續(xù)20日后觀察大鼠卵巢組織學及大體形態(tài)、體重、性激素變化。
　　結果：兩組外觀及一般行為未見明顯異常且無明顯差異；PCOS

4、實驗組最終體重、增加體重、卵巢重量及相對重量均顯著高于對照組（P<0.05）；實驗組血清睪酮、雌二醇、促黃體生成素均顯著高于對照組（P<0.05），孕酮、促卵泡生長素及LH/FSH比值與對照組之間相比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；實驗組卵巢解剖大體形態(tài)較蒼白且出現(xiàn)多個擴張囊泡并含囊泡液，HE染色鏡下出現(xiàn)大量閉鎖卵泡、囊狀卵泡，顆粒細胞層減少，卵母細胞消失等。對照組卵巢組織大體外觀色澤較紅潤，鏡下見多個黃體及不同發(fā)育階段的卵泡，卵

5、泡內顆粒細胞層數(shù)增多。
　　結論：本實驗采用的外源性雄激素 DHEA皮下注射建模方法穩(wěn)定有效，符合臨床PCOS疾病癥狀特點，適用于多種與PCOS有關的實驗研究。
　　第二部分、模型中AR與CARM1及產(chǎn)物相關表達研究
　　目的：檢測該PCOS模型中AR與CARM1的表達情況，研究模型中胰島素抵抗、激素改變、AR與CARM1及其產(chǎn)物ADMA之間的關系。
　　方法：取第一部分實驗組及對照組大鼠血清，ELISA法檢測血

6、清中ADMA、空腹胰島素；取尾血檢測空腹血糖，計算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA值）評價胰島素抵抗情況；免疫組化確定CARM1在卵巢組織中的表達情況，Western Blot及熒光定量PCR檢測卵巢AR、CARM1蛋白及mRNA轉錄表達情況。
　　結果：實驗組血清空腹血糖、胰島素、HOMA值、ADMA均顯著高于對照組（P<0.05）；卵巢組織中的CARM1主要由顆粒細胞表達；AR、CARM1蛋白量及mRNA表達量實驗組顯著高于對照組（P