中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)(NETs)在腸缺血-再灌注損傷中的作用研究.pdf

1、目的：探究中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)（NETs）是否參與了腸缺血-再灌注損傷過程并加劇了腸粘膜的損傷程度，探究可否通過降解中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)從而改善腸缺血-再灌注損傷程度。
　　方法：清潔級wistar大鼠54只，雌雄各半，采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為對照組（A組，n=6）、缺血-再灌注組（B組，n=24）、缺血-再灌注+DNase-1注射組（C組，n=24），B組與 C組又各分為再灌注2小時(shí)組、6小時(shí)組，12小時(shí)組和24小時(shí)4個(gè)亞組，每

2、亞組各6只。A組開腹后即關(guān)腹，2小時(shí)后留取血液、小腸組織標(biāo)本；B組開腹后夾閉腸系膜上動(dòng)脈，1小時(shí)后松夾恢復(fù)灌注，采用抽殺法分別留取大鼠再灌注后2h、6h、12h、24h血液、小腸組織標(biāo)本；C組于松夾前15min靜脈注射DNase-1（10mg/KG體重），采用抽殺法留取大鼠再灌注后2h、6h、12h、24h血液及小腸組織標(biāo)本。采用ELISA法分別測定大鼠血漿及腸組織勻漿中瓜氨酸化組蛋白H3（cit H3）、超氧化酶歧化酶（SOD）、丙二

3、醛（MDA）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平和大鼠血漿中內(nèi)毒素濃度；各組大鼠按照Chiu`s評分標(biāo)準(zhǔn)行小腸粘膜損傷程度病理評分。
　　結(jié)果：⑴與A組相比，B組血漿和小腸組織中cit H3水平顯著上升，除B-24h組外其余3個(gè)亞組結(jié)果均具有顯著性差異（P＜0.01）；B組各亞組血漿和小腸組織中TNF-α水平大幅上升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；B組各亞組血漿內(nèi)毒素升高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），且4個(gè)亞組水平

4、均保持高位，差別不明顯；B組各亞組血漿及小腸組織中SOD水平均顯著降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），其中B-12h組血漿和腸組織中SOD水平均為各亞組最低； B組各亞組血漿及小腸組織中 MDA水平大幅上升，結(jié)果均具有顯著性差異，其中 B-12h組血漿和小腸組織中 MDA水平均為各亞組最高； B組各亞組腸粘膜損傷程度評分均顯著上升，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），其中B-12h組評分為各亞組最高。⑵與B組各亞組相比，C組各

5、亞組血漿和小腸組織中cit H3水平降低，但C-6h組血漿cit H3水平與B-6h組相比、C-12h組小腸組織中cit H3水平與B-12h組相比、C-24h組血漿和小腸組織中cit H3水平與 B-24h組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；C組各亞組血漿和小腸組織中TNF-α水平明顯降低，除C-24h組血漿TNF-α與B-24h組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異外（P＞0.05），其他各亞組無論血漿和小腸組織，其結(jié)果均具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P

6、＜0.01）；C組各亞組血漿內(nèi)毒素水平降低，除C-6h組外其余3個(gè)亞組與B組相對應(yīng)亞組相比結(jié)果均具有顯著性差異（P＜0.05），且整體水平為隨再灌注時(shí)間增加而緩慢下降；C組各亞組血漿和小腸組織中SOD水平均較高，但除C-12h組血漿SOD水平與B-12h組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異外（P＞0.05），其余各亞組無論血漿和腸組織，與B組各亞組相比結(jié)果均具有顯著性差異（P＜0.05）；除C-6h組血漿MDA與B-6h組相比無差異（P＞0.05）外，C

7、組其余亞組血漿和腸組織中MDA水平均明顯下降，結(jié)果具有顯著性差異（P＜0.01），其中C-6h組血漿和腸組織中MDA水平均為C組最高；C組各亞組小腸粘膜損傷評分均有所降低，但C-2h組和C-6h組與對應(yīng)的B組亞組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），評分水平最高的為C-2h組。
　　結(jié)論：①腸缺血-再灌注損傷時(shí)大鼠血漿和腸組織中cit H3明顯上升。②大鼠腸缺血-再灌注后12h過氧化損傷程度和腸粘膜損傷程度最嚴(yán)重。③降解NETs后