中性粒細(xì)胞的清除在小鼠腹膜炎肺損傷中作用.pdf

1、目的:1、研究正常小鼠建立急性細(xì)菌性腹膜炎模型后肺損傷的情況;2、研究正常小鼠去除中性粒細(xì)胞后腹膜炎并發(fā)肺損傷的情況;3、通過觀察并比較小鼠經(jīng)過不同的處理后肺損傷的情況，來研究小鼠中性粒細(xì)胞的清除在小鼠繼發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎并發(fā)急性肺損傷的作用及影響。
　　方法:1、將80只體重在20～23g的健康清潔小鼠分為兩組，每組40只，分為去除中性粒細(xì)胞組(N)、未去除中性粒細(xì)胞組(T);2、將N組小鼠于尾靜脈注射單克隆抗體Ly6G-1A8試

2、劑，通過小鼠眼角內(nèi)眥靜脈毛玻璃管采血，檢測(cè)尾靜脈注射前及注射24小時(shí)(h)后的血常規(guī)，記錄抗體注射前后小鼠外周血中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，T組小鼠尾靜脈注射生理鹽水對(duì)照，并同上操作檢測(cè)小鼠注射前后中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù);3、將N組及T組小鼠分別再分為腹膜炎組及偽腹膜炎組，共四組，每組小鼠各20只，標(biāo)記為去除中性粒細(xì)胞腹膜炎組(NP)，去除中性粒細(xì)胞偽腹膜炎組(NS)，未去除中性粒細(xì)胞腹膜炎組(TP)，未去除中性粒細(xì)胞偽腹膜炎組(TS);4、四組小鼠尾靜脈

3、注射藥物12h后開始禁食，自由飲水，禁食12h，注射抗體24小時(shí)（即禁食12h后）后予腹腔注射大腸桿菌液及生理鹽水，NP、TP兩組小鼠腹腔注射用Mc Farland標(biāo)準(zhǔn)管比濁計(jì)數(shù)制成3×108CFU/ml濃度的大腸桿菌液，NS及TS組腹腔注射等量生理鹽水作對(duì)照組;5、通過觀察四組小鼠的死亡情況、肺病理切片、肺濕/干比值、氧合指數(shù)，評(píng)價(jià)肺損傷程度;6、取肝、脾組織作病理，觀察腹膜炎情況;6、無菌環(huán)境下取四組小鼠的腹腔積液、肝、脾臟組織勻漿

4、做細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定。
　　結(jié)果:1、建立腹膜炎以及偽腹膜炎模型至24h時(shí)四組小鼠死亡率分別為:NP:60％，NS:0％，TP:75％，TS:0％; NP、TP組均有小鼠死亡，NS及對(duì)照組(TS)無小鼠死亡;以大腸桿菌建立腹膜炎模型組的小鼠比較，NP組小鼠死亡率比TP組低，兩組比較具有顯著差異性(p＜0.01）。2、腹膜炎組小鼠(NP，TP)開胸后胸腔積液明顯，肺、肝、脾臟組織病理切片顯示中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，有急性肺損傷;NP與TP組小鼠

5、比較，NP組小鼠的肺組織濕/干比值較TP組低(2.74±0.43 vs3.92±0.88)(p＜0.01)，NP組小鼠氧合指數(shù)高于TP組(443.22±28.20 vs250.58±23.01)(p＜0.01)，NP組小鼠肺組織損傷評(píng)分低于TP組(5.4±0.8 vs7.8±1.3)(p＜0.01);3、偽腹膜炎組(NS及TS)組小鼠開胸后無明顯胸腔積液，肺組織濕/干比值低，氧和指數(shù)正常，肺、肝、脾臟病理切片均無明顯異常，兩組小鼠無明顯