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文檔簡介
1、目的:觀察補體在小鼠腦缺血-再灌注損傷過程中的表達和沉積變化情況,探討其在腦缺血-再灌注損傷中的意義。
方法:72只健康雄性C57BL/6小鼠隨機分為正常組、缺血再灌注6h、24h、48h、72h、96h,每組均為12只;48只健康昆明小鼠,隨機分為正常組、缺血再灌注6h、24h、48h、72h、96h,每組均為8只;眼鏡蛇毒因子(CVF)治療組、PBS組、正常組,每組6只。采用線栓法制備小鼠大腦中動脈閉塞(MCAO)模型,缺
2、血1h后再灌注。記錄小鼠大腦神經(jīng)功能缺失程度、腦組織病理的動態(tài)變化、腦組織梗死面積,應(yīng)用免疫熒光組織化學(xué)法及熒光定量PCR法檢測腦內(nèi)補體成分的沉積和表達。
結(jié)果:局灶性腦缺血-再灌注后神經(jīng)功能缺失評分最高出現(xiàn)在再灌注后24h,腦組織病理損傷在再灌注后24h達最重,腦組織冠狀切片TTC染色后于再灌注24h缺血損傷體積最大,腦內(nèi)補體分子C3d、C4d、C5b-9、MBL-A隨著再灌注時間的延長沉積逐漸增高,至24h達最高,48h以
3、后沉積逐漸減少,CVF治療組,相比PBS組,再灌注24h時神經(jīng)功能缺損評分明顯降低,腦組織病理損傷和TTC染色腦組織梗死體積顯著減輕。數(shù)據(jù)表明,補體分子的激活參與了腦組織損傷。相反,補體調(diào)節(jié)蛋白CD59、CD46的表達水平逐漸減少,至再灌注后24h達最低,再灌注96h基本恢復(fù)正常,補體調(diào)節(jié)蛋白CD59、CD46表達水平與腦組織損傷、神經(jīng)功能缺損評分和補體分子的表達量呈負相關(guān)。提示:當腦缺血再灌注損傷逐漸加重時,損傷區(qū)補體分子的沉積也逐漸
4、增多,當損傷減輕時,補體分子的沉積則相應(yīng)減少;由于補體系統(tǒng)激活同時也會損傷正常組織,作為體內(nèi)能夠調(diào)節(jié)補體分子激活使正常組織免遭損傷的補體調(diào)節(jié)蛋白,在損傷逐漸加重時其表達量卻逐漸減少,當損傷減輕時表達量則又逐漸恢復(fù),說明在腦缺血再灌注損傷中有補體系統(tǒng)參與。
結(jié)論:腦缺血-再灌注后補體分子大量激活,參與了腦組織損傷的全過程,并與腦組織損傷程度密切相關(guān),通過調(diào)節(jié)和損傷密切相關(guān)的重要補體分子的表達和沉積可為治療腦缺血-再灌注損傷提供新
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