慢性間歇性缺氧對大鼠心肌的影響及脂聯(lián)素的干預(yù)機制.pdf

1、目的：
　　阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(obstructive sleep apnea syndrome; OSAS)是臨床上常見的一種疾病，與高血壓、心衰、動脈粥樣硬化等許多心血管疾病有密切的關(guān)系。慢性間歇性缺氧(chronic intermittent hypoxia; CIH)是OSAS主要的病理生理學(xué)特征。本研究主要目的在于(1)CIH是否對大鼠心功能造成損傷及其損傷機制。(2)探索內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所致的心肌細胞凋亡及心肌纖維化在

2、CIH致大鼠心功能損傷中的機制。(3)探索脂聯(lián)素(adiponectin，Ad)對心臟的保護作用及其可能的調(diào)控機制，從而為治療OSAS研制新藥提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　將45只健康成年雄性Wistar大鼠(SPF級別，體重180-200g)隨機分成三組:正常對照組（normal control; NC）、慢性間歇性缺氧組(CIH)和慢性間歇性缺氧+脂聯(lián)素組(CIH+Ad)，每組15只。其中CIH和CIH+Ad組接受慢性

3、間歇性缺氧處理，每天8小時，共5周。而CIH+Ad組每周接受2次脂聯(lián)素尾靜脈注射，每次注射量10ug。造模完成后，使用ELISA法檢測大鼠血清脂聯(lián)素水平、超聲心動圖檢測大鼠心功能、Terminal deoxynucleotidyl transfer-mediated dUTPnick end-labeling(TUNEL)法檢測大鼠心肌細胞凋亡、Masson染色檢測心肌纖維化、DHE染色檢測大鼠心肌ROS水平、western blot法

4、檢測大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白及PCR法檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激基因表達。以p＜0.05作為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　造模結(jié)束后，研究發(fā)現(xiàn)CIH組大鼠脂聯(lián)素濃度(1442±133.3ng/ml)明顯低于NC組(1872±286.1 ng/ml)，而CIH+Ad組脂聯(lián)素濃度(1757±251.6 ng/ml)則明顯高于CIH組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。而CIH+Ad組脂聯(lián)素濃度與NC組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。超聲心

5、動圖顯示與NC組相比，CIH組大鼠心功能明顯下降。與CIH組相比，CIH+Ad組大鼠心功能有明顯改善，但仍低于NC組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。TUNEL染色顯示CIH組大鼠心肌細胞凋亡率明顯高于NC組和CIH+Ad組，而CIH+Ad組心肌細胞凋亡率仍顯著高于NC組，以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。Masson染色顯示CIH組心肌纖維化面積明顯大于NC組，CIH+Ad心肌纖維化面積明顯低于CIH組但高于NC

6、組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。DHE染色顯示與NC和CIH+Ad組相比，CIH組大鼠心肌組織ROS.水平明顯增高，而CIH+Ad組大鼠心肌組織ROS水平明顯高于NC組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。Western Blot法顯示CIH組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白及心肌纖維化相關(guān)蛋白表達水平明顯高于NC組和CIH+Ad組，而CIH+Ad組相關(guān)蛋白表達水平明顯高于NC組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。P

7、CR顯示與NC組相比，CIH組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及心肌纖維化相關(guān)基因表達明顯升高。而CIH+Ad組相關(guān)基因較CIH組相比表達下降，較NC組相比表達仍增高。
　　結(jié)論：
　　本研究主要發(fā)現(xiàn):(1) CIH可以引起大鼠血清脂聯(lián)素水平下降，同時引起大鼠心功能障礙。(2)大鼠心肌細胞凋亡及大鼠心肌纖維化是引起大鼠心功能障礙的重要機制。(3) CIH引起大鼠心肌組織ROS產(chǎn)生增加從而引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，進而誘導(dǎo)心肌細胞凋亡。(4)補充脂聯(lián)素后，脂