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1、目的:觀察慢性間歇性缺氧對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦梗死體積、神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)、細(xì)胞凋亡、Bcl-2、Bax表達(dá)的變化,探討其對(duì)大鼠腦缺血再灌注后可能的神經(jīng)損害作用機(jī)制。
方法:58只健康雄性SD大鼠隨機(jī)選取10只大鼠進(jìn)行CIH預(yù)實(shí)驗(yàn),每只大鼠缺氧前后均查血?dú)夥治?,以判斷是否達(dá)到低氧血癥及低氧的程度。造模成功后,隨機(jī)分為5組,正常對(duì)照組、假手術(shù)組、缺血再灌24小時(shí)組、CIH4周+缺血再灌24小時(shí)組、CIH8周+缺血再灌24小時(shí)組,
2、缺血組和CIH合并缺血組義分別分為測(cè)體積組及免疫組化組,每組6只。分別用光鏡觀察受損組織細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變,免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)水平,TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,TTC染色檢測(cè)梗死體積,利用神經(jīng)功能缺損評(píng)分評(píng)價(jià)神經(jīng)功能缺損情況。
結(jié)果:大鼠TTC染色示CIH8周+缺血再灌注組的梗死體積及神經(jīng)功能缺損評(píng)分大于其余兩組(P<0.05)。CIH4周+缺血再灌注24小時(shí)組與缺血再灌組比較無顯著差異(P>
3、0.05)。TUNEL染色陽性細(xì)胞主要分布在壞死灶的周邊和皮質(zhì)區(qū)。CIH8周+缺血再灌注組的細(xì)胞凋亡數(shù)大于其余兩組(P<0.01)。CIH4周+缺血再灌注組與缺血再灌組比較無顯著差異(P>0.05)。CIH8周+缺血再灌組Bcl-2蛋白表達(dá)減低(P<0.01),Bax蛋白表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05),Bcl-2/Bax比值減低(P<0.05)。CIH4周+缺血再灌組Bcl-2蛋白表達(dá)及Bcl-2/Bax比值比缺血再灌組減低(P<0.01)。
4、然而,CIH4周+缺血再灌組Bax蛋白表達(dá)與缺血再灌組比較差異無顯著意義(P>0.05),CIH8周+缺血再灌注24小時(shí)組Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)Bcl-2/Bax比值與CIH4周+缺血再灌24小時(shí)組比較無顯著差異(P>0.05)。
結(jié)論:(1)CIH可以增加腦缺血再灌后大鼠神經(jīng)功能缺損、梗死體積。(2)隨著CIH時(shí)間延長(zhǎng),可使大鼠腦缺血后缺血半暗帶的細(xì)胞凋亡增加、Bax蛋白表達(dá)上調(diào),Bcl-2蛋白的表達(dá)下調(diào)、Bcl-2
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