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文檔簡介
1、目的:
潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC)是一種好發(fā)于結(jié)直腸的慢性非特性炎癥性腸病,以腹瀉、腹痛、血便伴里急后重為主要臨床癥狀,病變部位主要累及結(jié)、直腸的黏膜及黏膜下層且病情遷延不愈。UC在歐美等發(fā)達國家較為常見,但是隨著我國經(jīng)濟的不斷增長及生活物質(zhì)水平不斷提高,在消化系統(tǒng)疾病就診的人群中該病的診出率不斷升高且日趨常見。
目前關于UC的具體發(fā)病機制尚無定論,但眾多的臨床數(shù)據(jù)和動物實驗表明該病的
2、發(fā)生伴有明顯的腸道免疫失衡。為了更深入的研究該疾病及模擬其臨床的類似病理改變,246-三硝基苯磺酸(Ttrinitro-benzene-sulfonic acid,TNBS)和葡聚糖硫酸鈉((Dextransulfate sodium,DSS)誘導的腸炎模型最為常見,其中DSS有著更簡單的操作手段和更接近臨床的病理表現(xiàn),因此其成為近二十年來最為常用的腸炎模型誘導劑。
姜黃素是從姜科或天南星科植物的根莖中提取的一種化學成分,其中
3、含姜黃約3%~6%,是植物界中少有含二酮的色素,為二酮類化合物。越來越多的實驗研究發(fā)現(xiàn)姜黃素對UC有著明顯的控制作用。
腸上皮間淋巴細胞(Intestinal intraepithelial lymphocytes,IEL)為腸道的免疫屏障主要構(gòu)成體,在維持腸道穩(wěn)態(tài)中扮演者至關重要的作用。它可以分泌KGF、TGF-β和IL-10促進腸上皮的更新與修復,還可以通過直接抵或分泌細菌肽抗入侵腸道的病原菌。另外也有研究報道UC患者腸標
4、本中伴有明顯的IEL細胞亞群變化。
姜黃素可以明顯緩解UC,而不管是UC患者還是實驗中由DSS誘導的炎癥性腸病模型腸道的IEL亞群都發(fā)生了明顯的變化。本研究通過構(gòu)建小鼠的潰瘍性結(jié)腸炎模型,研究姜黃素對腸黏膜屏障的保護其具體機制可能通過調(diào)節(jié)腸道IEL亞群實現(xiàn)。
方法:
1.構(gòu)建小鼠DSS誘導的潰瘍性結(jié)腸炎模型,通過DAI評分、HE染色、RT-PCR、Ussing Chamber等手段,觀察結(jié)腸黏膜炎癥損傷情況
5、。
2.圍繞結(jié)腸炎模型,運用流式細胞術、RT-PCR技術,觀察IEL亞群的變化情況及其相應分泌的細胞因子變化。
3.DSS誘導小鼠的同時給予姜黃素治療,采用DAI評分、PT-PCR、HE染色、UssingChamber等技術,檢測腸黏膜的炎癥變化;流式細胞術檢測結(jié)腸IEL亞群的變化情況。
結(jié)果:
1.與對照組比較,DSS處理組結(jié)腸黏膜明顯斷裂、脫落、分離且通透性升高,DAI評分顯著升高;與DSS組
6、相比,經(jīng)過對DSS+姜黃素治療組(濃度為80mg/mL)處理五天結(jié)腸黏膜的炎癥損傷情況明顯得到緩解,結(jié)腸組織黏膜的通透性和小鼠的DAI評分降低明顯。
2.與對照組比較,DSS組結(jié)腸黏膜產(chǎn)生更多的炎癥介質(zhì)及IEL分泌的保護性細胞因子明顯減少;與DSS組相比,DSS+姜黃素治療組腸黏膜組織中的破壞性炎癥介質(zhì)明顯降低、IEL產(chǎn)生的保護性細胞因子升高。
3.與對照組比較,DSS組IEL亞群比例CD8αα和γδ IEL顯著降低
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