丁氏潰結(jié)灌腸液對(duì)DSS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎大鼠腸道屏障作用的相關(guān)研究.pdf

1、目的:研究丁氏潰結(jié)灌腸液對(duì)葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium，DSS)誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis，UC)大鼠的結(jié)腸組織中緊密連接蛋白(Occludin)、粘蛋白2(MUC2)和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、血清免疫球蛋白A(IgA)的影響，探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法:隨機(jī)挑選10只大鼠，歸入到空白對(duì)照組，其余的50只通過飲用DSS水溶液的方法建立大鼠UC模型。模型復(fù)制成

2、功后，將參加造模的大鼠隨機(jī)的分為5組，即模型組、丁氏潰結(jié)灌腸液低劑量組、丁氏潰結(jié)灌腸液中劑量組、丁氏潰結(jié)灌腸液高劑量組、美沙拉秦灌腸液組。除空白對(duì)照組外，其余各組給予生理鹽水和相應(yīng)藥物連續(xù)灌腸14d。治療14d后采用腹主動(dòng)脈取血的方法，將全部大鼠處死，并剖取結(jié)腸標(biāo)本。觀察大鼠的體重、大便性狀、便血情況及結(jié)腸組織的損傷變化并評(píng)分，評(píng)估疾病活動(dòng)指數(shù)(Disease Activity Index，DAI)，肉眼觀察結(jié)腸組織大體情況并評(píng)分，光鏡

3、下觀察結(jié)腸組織病理?yè)p傷并評(píng)分，酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定血清IgA含量、蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)法檢測(cè)結(jié)腸組織Occludin蛋白水平、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-Time PCR)檢測(cè)結(jié)腸組織MUC2mRNA、iNOS mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1、造模后大鼠精神萎靡、體重下降、大便溏稀伴有黏液膿血，DAI評(píng)分與空白對(duì)照組比較增高(P＜0.05)。灌腸治療后，丁氏潰結(jié)灌腸液組和美沙拉秦灌腸液組大鼠上述癥

4、狀好轉(zhuǎn)，DAI評(píng)分與模型組比較降低(P＜0.05)。其中丁氏潰結(jié)灌腸液低劑量組情況不及其他用藥祖，但也好于模型組。
　　2、肉眼觀察，模型組大鼠結(jié)腸粘膜出現(xiàn)不完整損傷，明顯充血、水腫，并伴有潰瘍形成，與空白對(duì)照組比較大體評(píng)分增高(P＜0.05)。丁氏潰結(jié)灌腸液各組及美沙拉秦灌腸液組大鼠結(jié)腸粘膜損傷后得以修復(fù)，僅出現(xiàn)了充血、水腫、輕度糜爛，未見到明顯的潰瘍形成，與模型組比較大體評(píng)分下降(P＜0.05)。
　　3、光鏡下觀察，模

5、型組大鼠結(jié)腸粘膜損傷后出現(xiàn)壞死脫落，伴發(fā)不同程度的潰瘍?cè)?，大量炎癥性細(xì)胞浸潤(rùn)，粘膜腺體被破壞，排列稀疏紊亂，甚至缺如，并有程度不一的擴(kuò)張，與空白對(duì)照組大鼠比較病理評(píng)分顯著增加(P＜0.01)。丁氏潰結(jié)灌腸液各組和美沙拉秦灌腸液組大鼠結(jié)腸粘膜未有明顯的潰瘍形成，粘膜水腫充血和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少，與模型組比較病理評(píng)分明顯的降低(P＜0.01)。
　　4、模型組大鼠血清IgA含量、結(jié)腸組織Occludin蛋白表達(dá)水平，與空白對(duì)照組相比顯著

6、下降(P＜0.05)，經(jīng)丁氏潰結(jié)灌腸液及美沙拉秦灌腸液治療后，各組血清IgA含量、結(jié)腸組織Occludin蛋白表達(dá)水平升高，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　5、模型組大鼠結(jié)腸組織iNOS mRNA的表達(dá)水平，與空白對(duì)照組比較明顯的升高(P＜0.01)，經(jīng)丁氏潰結(jié)灌腸液和美沙拉秦灌腸液治療后，各組iNOS mRNA的表達(dá)呈下降趨勢(shì)，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。模型組大鼠結(jié)腸組織MUC2 mRNA的表達(dá)水

7、平，與空白對(duì)照組比較明顯的減低(P＜0.01)，經(jīng)丁氏潰結(jié)灌腸液和美沙拉秦灌腸液治療后，MUC2 mRNA的表達(dá)水平顯示升高，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。在mRNA表達(dá)水平上的比較，丁氏潰結(jié)灌腸液中高劑量組與美沙拉秦灌腸液組之間無明顯差異。
　　結(jié)論:1、丁氏潰結(jié)灌腸液對(duì)DSS誘導(dǎo)的UC有一定治療作用，可有效減輕其大便不成形、便血、體重下降等癥狀，使腸粘膜組織炎癥好轉(zhuǎn)，降低DAI評(píng)分和大體、病理評(píng)分。2、對(duì)于DSS誘