塞來(lái)昔布灌腸對(duì)AOM-DSS誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜異型增生的防治作用及相關(guān)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、目的：潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜異型增生是以潰瘍性結(jié)腸炎為基礎(chǔ)疾病，經(jīng)炎癥反復(fù)刺激，使結(jié)直腸黏膜病理表現(xiàn)為黏膜上皮和腺體偏離正常分化，形態(tài)和機(jī)能上呈異型性表現(xiàn)的一種結(jié)直腸黏膜異型增生性疾病。現(xiàn)潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜異型增生已明確為結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)的癌前病變之一，其發(fā)生可以使?jié)冃越Y(jié)腸炎（ulcerativecolitis，UC）的癌變率明顯增高，同時(shí)，其在UC癌變過(guò)程中起重要作用，目前針對(duì)該疾病較為明確的預(yù)防性

2、藥物為美沙拉秦。研究發(fā)現(xiàn)炎癥、增生及腫瘤等的發(fā)生與環(huán)氧化物酶COX-2的高表達(dá)有關(guān)。塞來(lái)昔布作為一種COX-2抑制劑，對(duì)炎癥、增生、腫瘤等的發(fā)生具有干擾作用。然而UC相關(guān)CRC與CRC具有一定的差異性，且塞來(lái)昔布經(jīng)口服可能存在肝腎功能異常、心血管等不良事件發(fā)生的可能，尤其在老年患者中。因此，本實(shí)驗(yàn)主要探討不同濃度塞來(lái)昔布經(jīng)灌腸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜異型增生的防治作用,并分析其可能的作用機(jī)制。
　　方法：選擇4～5周齡C57BL/6雄

3、性小鼠共60只，將其隨機(jī)分為6組，每組10只，分別被標(biāo)記為塞來(lái)昔布高劑量組(A組)、塞來(lái)昔布中劑量組(B組)、塞來(lái)昔布低劑量組(C組)、美沙拉秦組(D組)、模型組(E組)、空白組（F組）。適應(yīng)性喂養(yǎng)小鼠一周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，除空白組F組外，其他各組小鼠均通過(guò)氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸鈉（AOM/DSS）聯(lián)合法制備實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，具體步驟為給予小劑量氧化偶氮甲烷AOM(10mg/kg)單次腹腔注射,一周后2％葡聚糖硫酸鈉DSS飲用7d，正常飲水14

4、d。建模第5d時(shí)，給予A組1.5 mg/mL高劑量塞來(lái)昔布灌腸、B組1.0 mg/mL中等劑量塞來(lái)昔布灌腸、C組0.5 mg/mL低劑量塞來(lái)昔布灌腸、D組60g:4g劑量美沙拉秦灌腸液灌腸、E組同等劑量0.9%氯化鈉注射液灌腸，每天一次，每次0.1mL/10g。實(shí)驗(yàn)第4w末處死小鼠，肉眼觀察結(jié)直腸組織形態(tài)學(xué)變化，鏡下觀察結(jié)腸組織病理學(xué)改變及免疫組化標(biāo)記物COX-2、BCL-2、CDX-2表達(dá)結(jié)果，Elisa法檢測(cè)血清細(xì)胞因子水平，實(shí)驗(yàn)過(guò)

5、程中觀察各組小鼠毛色、體重、精神等一般情況改變。
　　結(jié)果:肉眼觀察較模型組E組，A、B兩組與F組相似，結(jié)直腸上皮黏膜表面光滑，血管紋理清晰，大便成型；C、D兩組結(jié)直腸上皮黏膜表面欠光滑，大便較成型。HE染色A、B兩組結(jié)直腸上皮黏膜較完整，腺體排列整齊，C組結(jié)直腸上皮黏膜伴有淺表性潰瘍，D組結(jié)直腸上皮黏膜偶伴有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象，E組結(jié)直腸上皮黏膜主要表現(xiàn)為慢性炎癥伴輕-中度異型增生；與空白組F組相比，模型組E組IL-6、TNF-α

6、血清細(xì)胞因子水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而各治療組IL-6、TNF-α水平較模型組E組明顯降低，其中A、B組TNF-α水平下降較其他治療組明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與空白組F組相比，免疫組化檢測(cè)結(jié)果中模型組E組COX-2、BCL-2水平評(píng)分明顯升高，而CDX-2水平評(píng)分明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），各治療組COX-2、BCL-2水平評(píng)分較模型E組明顯降低，而CDX-2水平評(píng)分較模型組E組

7、明顯升高，其中治療組A、B兩組COX-2水平評(píng)分明顯低于C、D兩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），治療組A、B、D三組BCL-2水平較C組評(píng)分低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而治療組A、B、C、D四組CDX-2水平評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：塞來(lái)昔布灌腸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜異型增生具有一定的防治作用，其中高、中劑量塞來(lái)昔布灌腸效果較明顯；機(jī)制可能與塞來(lái)昔布抑制COX-2、BCL-2的表達(dá)，減少IL-