蛇床子素對大鼠心室肌細(xì)胞離子通道的影響.pdf

1、目的:
　　離子通道的功能與性質(zhì)在心肌細(xì)胞動作電位的形成和傳導(dǎo)中起著關(guān)鍵作用，特別是電壓依賴性通道。本課題主要是通過細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，首先探討大鼠心房和心室肌興奮性不同的離子機(jī)理之一（鈉通道差異），然后觀察蛇床子素(Ost)對大鼠心室肌細(xì)胞的主要離子通道電流(INa、Ito)及其I-V曲線、激活動力學(xué)、失活動力學(xué)及失活后恢復(fù)動力學(xué)特征的影響，探討其對心臟產(chǎn)生的作用及作用機(jī)制。
　　方法:
　　采用Langendorff灌

2、流裝置，酶解法分離大鼠單個心室肌細(xì)胞;用含Ost的細(xì)胞外液灌流細(xì)胞，每個細(xì)胞采用給藥前后自身對照，利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄INa、Ito及其相關(guān)的動力學(xué)特征。
　　結(jié)果:
　　1.心房肌細(xì)胞的鈉電流(INa)密度比心室肌細(xì)胞大約30％，并且比心室激活和失活更快，而且心房肌細(xì)胞鈉電流失活后恢復(fù)速度較心室肌慢，心房肌的半數(shù)激活電壓和半數(shù)失活電壓要小于心室肌，心房的半數(shù)激活電壓(V1/2)為(-44.65±0.26) mv，k為4

3、.59±0.37;心室肌的半數(shù)激活電壓(V1/2)為(-42.45.0±0.61) mv，k為4.52±0.55(P＜0.01，n=10)。心房肌的半數(shù)失活電壓(V1/2)為(-101.10±0.26) mv，k為-10.21±0.22;心室肌的半數(shù)失活電壓(V1/2)為(-81.0±0.45) mv，k為-10.24±0.39(P＜0.01，n=10);心房肌細(xì)胞失活后恢復(fù)時間((o))長于心室肌。心房肌的τ值為(26.77±0.03

4、)ms，心室肌細(xì)胞的τ值為(15.99±0.06) ms(P＜0.01，n=10).
　　2.Ost呈時間和濃度依賴性抑制INa。當(dāng)濃度大于100μM時，Ost可使INa的I-V曲線顯著上移，100μM和300μM蛇床子素使峰值鈉電流(-29.83±4.21) pA/pF分別降為(-20.11±3.7) pA/pF and(-17.74±5.7)pA/pF(P＜0.01，n=10)，但I(xiàn)-V曲線的形狀、激活電位、峰電位和反轉(zhuǎn)電位不

5、改變，但可使激活曲線顯著右移。此外，Ost能使INa的失活曲線顯著左移，即向超極化方向移動，100μM和300μM蛇床子素使V1/2由用藥前的(-81.10±0.35mV) mV分別變?yōu)?-91.62±1.06) mV和(-100.60±0.21)mV(n=10，P＜0.01)，k從（9.95±0.31）mV變?yōu)?9.93±0.18) mV(P＞0.05，n=10)和(12.70±0.94) mV(P＜0.01，n=10)。不僅如此，O

6、st還能使INa的失活后恢復(fù)曲線顯著右移，τ由給藥前的(15.09±0.78) ms變?yōu)?23.41±1.23) ms和(31.62±0.97) ms(P＜0.01,n=10)。
　　3.Ost呈時間和濃度依賴性抑制Ito。當(dāng)濃度大于300μM時，Ost可使Ito的I-V曲線顯著下移，300μM蛇床子素使峰值鉀電流(33.75±3.60) pA/pF降為(11.52±2.41) pA/pF(n=6，P＜0.01)，并使激活曲線顯著

7、右移。此外，Ost能使Ito的失活曲線顯著左移，即向超極化方向移動，100μM和300μM蛇床子素使V1/2由用藥前的(-38.48±0.92) mV分別變?yōu)?-49.48±1.54) mV和(-74.34±0.79) mV(P＜0.01，n=10)，k從(13.93±0.81)變?yōu)?16.00±1.36)和(11.53±0.70).(P＜0.01，n=10)。最后Ost同樣能使Ito的失活后恢復(fù)曲線顯著右移，τ由給藥前的(70.09±