Visfatin對大鼠心室肌細胞離子通道的影響.pdf

1、Visfatin是一種由脂肪組織分泌的蛋白質(zhì)因子，血漿visfatin濃度與內(nèi)臟脂肪量成正相關(guān)，而與皮下脂肪量關(guān)系微弱。Visfatin分子量為52KDa，cDNA檢測顯示，它與以往在淋巴細胞中發(fā)現(xiàn)的一種被稱為前B細胞集落增強因子（pre-Bcellcolony-enhancingfactor,PBEF）的物質(zhì)是同一種物質(zhì)。Visfatin在內(nèi)臟脂肪組織中高表達，在骨骼肌、肝臟、骨髓及淋巴細胞中也有不同程度表達。Visfatin由內(nèi)臟白

2、色脂肪中的巨噬細胞釋放，有類似胰島素的生物學效應，與代謝性疾病和慢性炎性疾病關(guān)系密切。近年發(fā)現(xiàn)visfatin對急性心肌缺血再灌注損傷有保護作用。多種通道電流與心肌缺血再灌注損傷有關(guān)，其中鈉鈣交換體抑制劑對心肌缺血再灌注損傷的保護作用已得到公認。本工作以單個大鼠心室肌細胞為模型，應用全細胞膜片鉗技術(shù)，觀察visfatin對大鼠心室肌細胞鈉鈣交換電流（INa/Ca）、L型鈣通道電流（ICa，L）、ATP敏感鉀通道電流（IKATP）的作用，

3、以明確visfatin對心肌電生理的影響，并探討visfatin抗心肌缺血再灌注損傷的離子電流機制。
　　目的：本實驗旨在研究visfatin對大鼠心室肌細胞離子電流的作用，并探討visfatin抗心肌缺血再灌注損傷的離子電流機制。
　　方法：雄性SD大鼠（250-320g），肝素抗凝后，腹腔麻醉，斷頭處死，迅速取其心臟，懸掛于Langendorff灌流系統(tǒng)，先用無鈣臺式液灌流5分鐘，再以Ⅰ型膠原酶溶液灌流心臟，待心臟基本變

4、軟后剪取心室部分，剪碎吹打使之分離成為單個心室肌細胞，放入4℃KB液中備用。使用全細胞膜片鉗技術(shù)記錄心室肌細胞的INa/Ca、ICa，L、IKATP。給藥組以含不同濃度visfatin的細胞外液灌流心室肌細胞5min；對照組直接以細胞外液灌流5min，記錄并觀察電流曲線的變化。
　　結(jié)果：
　　1.Visfatin對大鼠心室肌細胞INa/Ca的影響
　　Visfatin對內(nèi)向、外向INa/Ca均有增大作用。對照組以不加

5、藥的細胞外液灌流心室肌細胞5min后，內(nèi)向鈉鈣交換電流減小了5±5％（n=8），外向鈉鈣交換電流減小了2±8%（n=8）。同樣條件下，以含有濃度分別為25nmol/L、250nmol/L、500nmol/L的visfatin的細胞外液灌流心室肌細胞5min后，其內(nèi)向鈉鈣交換電流比給藥前增大20±12%(n=6，P<0.05)，24±6%(P<0.05，n=6)，35±5%(P<0.05，n=5)。25nmol/L的visfatin使外向

6、鈉鈣交換電流比給藥前降低了2±8%（P>0.05，n=6），250nmol/L和500nmol/L的visfatin使外向鈉鈣交換電流分別比給藥前增加了6±4%（P<0.05，n=6），15±3%（P<0.05，n=5）。
　　2.Visfatin對大鼠心肌細胞ICa，L的影響
　　Visfatin可降低大鼠心肌細胞ICa，L，以visfatin濃度為250nmol/L的細胞外液灌流心肌細胞5min后，ICa，L降低了18士

7、4%（n=6），對照組由于rundown現(xiàn)象減小4士5%（n=8），給藥組與對照組相比較有顯著差異(P<0.01)。
　　3.Visfatin對大鼠心肌細胞IKATP的影響
　　在由50mV到-100mV持續(xù)125ms的斜坡刺激下記錄心肌細胞IKATP。250nmol/L的visfatin不能使該電流增加，給予吡那地爾（pinacidil）后該電流明顯增加，并且能被格列本脲（glibenclamide）阻斷（說明該電流是IK

8、ATP），提示visfatin不能使靜息狀態(tài)下心肌細胞的ATP敏感鉀通道開放。
　　結(jié)論：本工作以單個大鼠心室肌細胞為模型，應用全細胞膜片鉗技術(shù)，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，visfatin可濃度依賴性地增大心室肌細胞的內(nèi)向INa/Ca，高濃度的visfatin對外向INa/Ca也有一定增加作用。visfatin可降低ICa，L，對IKATP無作用。上述結(jié)果表明，visfatin對心臟缺血再灌注損傷的保護可能與增加內(nèi)向INa/Ca，降低ICa，L