氨甲環(huán)酸不同給藥途徑對UVB誘導(dǎo)豚鼠色素沉著的抑制作用.pdf

1、目的：自1979年日本學(xué)者首次發(fā)現(xiàn)并報道了口服氨甲環(huán)酸對黃褐斑有治療效果以來，國內(nèi)外學(xué)者對其在治療黃褐斑方面進(jìn)行了許多探索和研究，為黃褐斑的臨床治療做出了突出貢獻(xiàn)。但氨甲環(huán)酸不同給藥途徑在治療黃褐斑等色素沉著性疾病的療效差異方面鮮有報道，本研究以NB-UVB照射豚鼠棕黃色皮膚為色素沉著動物模型，通過氨甲環(huán)酸的不同給藥途徑對豚鼠皮膚色素沉著、黑素細(xì)胞數(shù)目、黑素顆粒合成及HMB45陽性表達(dá)的影響，探索氨甲環(huán)酸的最佳給藥途徑，為指導(dǎo)臨床治療色

2、素沉著性疾病提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.色素沉著動物模型的誘導(dǎo)：健康花色豚鼠30只（普通級），雌性，1～2月齡，體重260g～376g，平均319g，將豚鼠棕黃色部分皮膚脫毛，接受NB-UVB照射，照射前調(diào)整焦距，使兩個紅色指示燈重合，照射劑量為900mJ/cm2，1次/周，共3次，總劑量2700mJ/cm2；
　　2.分組及處理：造模成功后，將30只豚鼠隨機(jī)分為4組，其中對照組6只，處理組各8只，對照組無治療

3、處理，A組予氨甲環(huán)酸注射液靜脈滴注治療，1次/周，B組予氨甲環(huán)酸注射液皮內(nèi)注射治療，1次/3日，C組予氨甲環(huán)酸片口服治療，2次/日，3種給藥途徑的療程均為30日；
　　3.評價指標(biāo)：
　?、儆贜B-UVB照射前、治療前、治療結(jié)束后第2、4、6周，采用拍照大體比色評估色素沉著的變化；
　?、谟谏鲜鐾挥^察點取各組豚鼠造模區(qū)皮膚，排除時間因素對實驗結(jié)果的干擾，分別進(jìn)行黑素細(xì)胞(Melanocyte，MC）染色(Imokaw

4、a法)、黑素顆粒染色(Masson-Fontana M-F法)以及免疫組織化學(xué)染色（單克隆抗體HMB45），觀察表皮色素沉著、MC數(shù)目、黑素顆粒合成以及HMB45陽性表達(dá)的改變；
　　4.使用IBM SPSS21.0統(tǒng)計軟件對各指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計描述及析因設(shè)計方差分析。
　　結(jié)果：
　　1.豚鼠棕黃色皮膚區(qū)照射NB-UVB后，成功制備色素沉著動物模型，照射NB-UVB后豚鼠皮膚均無明顯水腫、水泡及脫屑，4～6天后開始出現(xiàn)輕度

5、紅斑及不均勻色素沉著斑，后逐漸較正常皮膚加深并趨于均勻；
　　2色素沉著評分、MC數(shù)目、黑素顆粒合成以及HMB45陽性表達(dá)的改變:①各組造模區(qū)域皮膚色素沉著均有不同程度減退，其中靜脈滴注及皮內(nèi)注射組豚鼠皮膚顏色基本恢復(fù)至照射前水平，口服組豚鼠皮膚較照射前仍有輕度色素沉著，對照組減退較少，色素沉著未見明顯改善，各組色素沉著評分分別為：對照組1.83±0.40，靜脈滴注組0.37±0.51，皮內(nèi)注射組0.50±0.53，口服組0.62

6、±0.76;② MC數(shù)目變化、黑素顆粒合成及HMB45陽性表達(dá)的變化，對照組分別為：427.50±2.25，0.89±.086，0.87±0.10，氨甲環(huán)酸治療組造模區(qū)域皮膚MC數(shù)目、黑素顆粒占表皮面積的百分比及HMB45陽性表達(dá)占表皮面積的百分比均小于對照組，其中，靜脈滴注組和皮內(nèi)注射組MC數(shù)目接近照射前水平，分別為：391.75±10.87，392.87±8.95，口服組為：413.75±9.80；黑素顆粒占表皮面積的百分比，靜脈滴

7、注組為：0.62±0.06，皮內(nèi)注射組為：0.70±0.05，口服組為：0.77±0.09，HMB45陽性表達(dá)占表皮面積的百分比，靜脈滴注組為：0.42±0.22，皮內(nèi)注射組為：0.54±0.18，口服組為：0.72±0.26。
　　實驗及統(tǒng)計學(xué)結(jié)果顯示：靜脈滴注及皮內(nèi)注射氨甲環(huán)酸在對色素沉著的抑制上均較對照組效果明顯，即有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），且靜脈滴注及皮內(nèi)注射氨甲環(huán)酸均較口服有效（P<0.05），但靜脈滴注及皮內(nèi)注射氨

8、甲環(huán)酸在色素沉著的評價上無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05），認(rèn)為這兩種途徑抑制色素沉著的作用相當(dāng)，口服氨甲環(huán)酸與對照組在色素沉著的評價上無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05），認(rèn)為口服氨甲環(huán)酸在本實驗中對色素沉著無明顯抑制作用。
　　結(jié)論：氨甲環(huán)酸不同給藥途徑治療NB-UVB誘導(dǎo)的豚鼠色素沉著均有不同程度抑制作用，從色素沉著評分、MC數(shù)目變化、黑素顆粒合成及HMB45陽性表達(dá)的變化等指標(biāo)的結(jié)果分析，靜脈滴注及皮內(nèi)注射氨甲環(huán)酸對色素沉著的抑制作用較