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1、目的:通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,研究羥基喜樹(shù)堿(HCPT)對(duì)細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響,并與甲氨蝶呤(MTX)比較,探討HCPT在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療方面的潛在價(jià)值,為進(jìn)一步研究提供科學(xué)依據(jù)。 方法:用MTT法檢測(cè)不同濃度和時(shí)間的HCPT及相同濃度和時(shí)間的HCPT與MTX各自作用的吸光度值(A),計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(IR%);用碘化丙啶(PI)染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)不同濃度HCPT作用及相同濃度的HCPT與MTX各自作用下細(xì)胞周期
2、構(gòu)成的變化。 結(jié)果:HCPT、MTX對(duì)體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞均具有增殖抑制作用,且均有時(shí)間、劑量依賴關(guān)系,表現(xiàn)為:吸光度值(A)下降,具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001),細(xì)胞抑制率(IR%)增加,不同的是:MTX的IC50值小于HCPT,而HCPT的最大抑制率約為MTX的2倍;HCPT、MTX均可使體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞的細(xì)胞周期構(gòu)成發(fā)生明顯變化,并且隨著藥物濃度的增大阻滯作用更加明顯(p<0.005),二者均作用于S期,M
3、TX使S期細(xì)胞減少、G0/G1期細(xì)胞增多,而HCPT使S期細(xì)胞增加、G0/G1期細(xì)胞減少。 結(jié)論:HCPT、MTX均可對(duì)體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞產(chǎn)生增殖抑制作用,且均表現(xiàn)出時(shí)間、劑量依賴關(guān)系,不同的是:MTX的效應(yīng)強(qiáng)度大于HCPT,而HCPT的最大效能大于MTX;HCPT、MTX均可對(duì)體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞的細(xì)胞周期構(gòu)成產(chǎn)生影響,且均作用于S期,不同的是HCPT作用于S中、晚期,即S→G2/M檢測(cè)點(diǎn),使S期細(xì)胞增加、G0/G1期細(xì)
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