瓜蔞含藥血清及彎齒琵甲對Hela細胞增殖抑制作用的研究.pdf

1、癌癥是威脅人類健康的常見病及多發(fā)病，然而，臨床常用的化學合成藥物給患者帶來嚴重的不良反應和明顯的毒副作用，因此，開發(fā)天然抗腫瘤藥物越來越受到人們重視。
　　 瓜蔞是栝樓或雙邊栝樓的成熟果實，是抗癌中藥復方中常見的藥物，為了明確瓜蔞水煎劑對腫瘤細胞增殖的影響，本實驗利用血清藥理學方法制備高、中、低3種劑量的瓜蔞含藥血清，分別處理Hela細胞24 h和48 h，MTT 法檢測該含藥血清對Hela細胞生長的抑制作用，Wright's-

2、Giemsa 染色和AO-EB 染色法觀察凋亡細胞的形態(tài)學變化，利用DNA 瓊脂糖凝膠電泳從分子水平檢測其對腫瘤細胞的影響。結果表明，不同劑量的瓜蔞含藥血清均對Hela細胞的增殖有抑制作用，且呈劑量時間依賴關系，其中，高劑量組瓜蔞含藥血清對Hela細胞的抑制率最大，20％的高劑量瓜蔞含藥血清在24h、48h的抑制率能分別達到36.4％和48.2％，說明瓜蔞具有抑制宮頸癌Hela細胞增殖和誘導細胞凋亡的作用。
　　 彎齒琵甲(Bl

3、aps femoralis)是擬步甲科(Tenebrionidae)琵甲族(Blaptini)琵甲屬(BlapsFabricius,1775)的一個優(yōu)勢昆蟲，民間長期用于治療肺氣腫、風濕、腫瘤等疑難雜癥。
　　 本研究首先利用血清藥理學的方法制備彎齒琵甲含藥血清，采用上述方法研究彎齒琵甲對Hela細胞增殖的抑制作用。結果顯示彎齒琵甲含藥血清能夠抑制腫瘤細胞增殖，且呈時效、量效關系，其中，20％琵甲高濃度含藥血清在24h和48h的

4、抑制率分別能達到23.4％和37.3％。
　　 為了進一步分析彎齒琵甲抗腫瘤作用的有效成分，本研究采用硫酸銨沉淀法得到彎齒琵甲粗蛋白提取液，進行體外實驗。倒置熒光顯微鏡下觀察凋亡細胞形態(tài)，DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測凋亡細胞DNA 斷裂情況，Annexin V-FITC/PI 雙染法定量檢測凋亡細胞以及Western-blot 法檢測Caspase-3蛋白表達的情況。結果顯示彎齒琵甲粗蛋白能夠誘導細胞凋亡，15m g ﹒mL-1的彎