連花清瘟膠囊拆方抗流感病毒藥理機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  通過研究連花清瘟膠囊拆方(麻杏石甘湯和銀翹散加減方)抗流感病毒的藥理作用特點,探討連花清瘟膠囊的組方特點及藥理作用。
  方法:
  1)以奧司他韋為陽性對照藥,細胞病變法(CPE)和MTT法體外檢測連花清瘟膠囊拆方(麻杏石甘湯和銀翹散加減方)對流感病毒的調(diào)節(jié)作用及對細胞的保護作用;2)以GAPDH為內(nèi)參基因,采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(qPCR)和ELISA法檢測流感病毒感染后24小時,藥物對炎性細胞

2、因子及趨化因子mRNA水平和蛋白水平的調(diào)節(jié)作用;3)免疫印跡法(Western blotting)檢測流感病毒感染后,藥物對相關信號通路NF-KB-p65的調(diào)節(jié)作用;4)用流感病毒A/PR/8/34(H1N1)標準株滴鼻感染小鼠建立小鼠感染模型,隨機分為正常對照組、模型對照組、奧司他韋組(60mg/kg/d)、麻杏石甘湯高劑量組(1000mg/kg/d)、中劑量組(500mg/kg/d)、銀翹散加減方高劑量組(800mg/kg/d)、中

3、劑量組(400mg/kg/d),觀察小鼠的一般情況,如體重變化、活動狀態(tài)、毛發(fā)、食欲等,測定肺指數(shù)、肺病毒滴度及肺組織病理。
  結(jié)果:
  1)CPE和MTT實驗結(jié)果顯示,麻杏石甘湯對不同亞型的人流感及禽流感病毒株(H1N1、H3N2、H6N2、H9N2、FluB)都有明顯的抑制效果,而銀翹散加減方體外并未顯示直接的抗流感病毒作用;2)qPCR及ELISA實驗結(jié)果顯示,麻杏石甘湯和銀翹散加減方都能抑制流感病毒感染后誘導產(chǎn)生

4、的過高的細胞因子及趨化因子(IP-10、IL-6、IL-8、MIG、CCL5、TNF-α等)的表達,對IP-10、IL-6的下調(diào)作用更明顯,與病毒組比較p<0.001;3)Western blotting實驗結(jié)果顯示,麻杏石甘湯在3~0.38mg/ml時能下調(diào)流感病毒感染后誘導的NF-KB-p65的磷酸化表達,并且這種下調(diào)作用與藥物濃度里梯度關系,隨著藥物濃度的降低下調(diào)作用逐漸減弱;銀翹散加減方在2~0.25mg/ml對NF-KB-p6

5、5的磷酸化表達也顯示出下調(diào)作用;4)麻杏石甘湯高劑量和中劑量組對流感病毒感染后小鼠的肺指數(shù)增高均有顯著的降低作用(p<0.001);銀翹散加減方中劑量組對流感病毒感染后小鼠的肺指數(shù)增高有顯著的降低作用(p<0.01),高劑量組對肺指數(shù)增高未顯示降低作用。
  結(jié)論:
  連花清瘟膠囊拆方中麻杏石甘湯體外具有直接抗流感病毒及下調(diào)流感病毒感染后上升的細胞因子及趨化因子的雙重作用,體內(nèi)對流感病毒感染后小鼠肺損害具有抑制作用,可能的

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