白芥CBL基因克隆及其在干旱脅迫下的表達(dá)分析.pdf

1、植物在其生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中總會(huì)受到外界環(huán)境中逆境因素的脅迫，當(dāng)植物遭受逆境刺激時(shí)，其細(xì)胞質(zhì)中的鈣離子濃度會(huì)發(fā)生周期性的震蕩，形成“鈣信號(hào)”。逆境信號(hào)的下游傳遞是通過(guò)細(xì)胞內(nèi)的鈣離子結(jié)合蛋白結(jié)合鈣離子信號(hào)來(lái)進(jìn)行的。目前已報(bào)道的鈣離子結(jié)合蛋白主要包括 CAM、CDPK、CBL等多種類型蛋白。CBL是在擬南芥中發(fā)現(xiàn)的一類植物所獨(dú)有的鈣離子結(jié)合蛋白。CBL通過(guò)與其下游的靶蛋白基因家族CIPKs相結(jié)合來(lái)發(fā)揮作用。CIPK是一類特有的存在于植物中的絲氨酸

2、/蘇氨酸蛋白激酶家族。CBL-CIPK信號(hào)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)在模式植物擬南芥及水稻中的研究較為深入，而在白芥中的研究卻未見(jiàn)報(bào)道。擬南芥全基因組序列的測(cè)序完成為研究其同源物種白芥中 CBL-CIPK逆境網(wǎng)絡(luò)應(yīng)答系統(tǒng)提供了重要的依據(jù)和參考。本課題克隆得到 CBL1、CBL2、CBL3、CBL4、CBL9、CBL10基因的部分序列，并通過(guò)RACE技術(shù)，得到CBL3基因全長(zhǎng)序列，之后以實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)其在干旱脅迫下的表達(dá)，具體研究結(jié)果如下：

3、　　1）通過(guò)同源克隆法從白芥植株中克隆得到了CBL1、CBL2、CBL3、CBL4、CBL9、CBL10基因的部分序列，其基因片段長(zhǎng)度分別為276bp、291bp、305bp、188bp、435bp和384bp。
　　2）克隆得到了CBL3基因全長(zhǎng)。CBL3基因的CDS序列為681bp，編碼226個(gè)氨基酸殘基，蛋白相對(duì)分子質(zhì)量25795.3，不穩(wěn)定系數(shù)39.65，氨基酸的平均親水性為-0.204。通過(guò)序列同源性比對(duì)以及進(jìn)化樹(shù)分析，