刺激前庭器官對(duì)大鼠部分基底神經(jīng)節(jié)C-Fos蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　黑質(zhì)-紋狀體多巴胺系統(tǒng)和膽堿能系統(tǒng)之間的功能失衡會(huì)引起帕金森氏病(Parkinson's disease，PD)，此病的運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)功能障礙為最大特點(diǎn)。人類及動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)和平衡能力在很大程度上是由前庭功能調(diào)控的。研究表明，PD患者伴有前庭功能減退者明顯多于正常人，同時(shí)PD模型動(dòng)物前庭神經(jīng)核(vestibularnuclear，VN)內(nèi)谷氨酸的含量和受體發(fā)生改變。這可能是患有帕金森的病人出現(xiàn)無(wú)法阻止性的震顫以及運(yùn)動(dòng)失衡的原因之

2、一。最近發(fā)現(xiàn)，適當(dāng)?shù)拇碳ぷ饔糜谇巴テ鞴倏梢愿纳芇D患者或模型動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能，而且VN可以通過(guò)束旁核間接地與紋狀體發(fā)生突觸聯(lián)系。但是前庭神經(jīng)系統(tǒng)與束旁核、黑質(zhì)、紋狀體間的功能聯(lián)系尚無(wú)研究報(bào)道。本次實(shí)驗(yàn)通過(guò)大鼠實(shí)驗(yàn)，擬用前庭電刺激結(jié)合免疫組化、藥理學(xué)等方法，觀察大鼠腦內(nèi)的神經(jīng)核團(tuán)情況，主要核團(tuán)有前庭內(nèi)側(cè)核、丘腦束旁核、黑質(zhì)、紋狀體，觀察這些區(qū)域核團(tuán)的c-Fos蛋白表達(dá)情況。探討前庭器官與基底神經(jīng)節(jié)之間的功能聯(lián)系及其神經(jīng)化學(xué)和受體機(jī)制。

3、>　　方法:
　　本研究選用體重250g～300g的清潔級(jí)SD雄性大鼠。首先用水合氯醛(300mg/kg)進(jìn)行麻醉，進(jìn)行外科手術(shù)，皮膚表面消毒后沿耳緣進(jìn)行切口剪開(kāi)，用微型電鉆磨平耳鼓表面，暴漏水平半規(guī)管，沿著水平半規(guī)管的方向向壺腹嵴處插入尖端裸露的漆包線電極，牙科水泥固定，通過(guò)此方法將電極插入外周前庭器官后進(jìn)行刺激外周前庭器官。分成兩大組:空白對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組?？瞻讓?duì)照組大鼠取6例，將刺激電極植入大鼠前庭器官后不給與電刺激。實(shí)驗(yàn)組包

4、括前庭神經(jīng)內(nèi)側(cè)核(Medial vestibular nucleus，MVN)組、束旁核(Parafascicularis，PF)組、紋狀體（Caudate putamen，CPu）組、黑質(zhì)(Substantia nigra，SNR)等4個(gè)組，每組6例，共24例。各組大鼠前庭器官植入電極，隨后給予電刺激。根據(jù)刺激后動(dòng)物的動(dòng)眼反應(yīng)尋找最佳的刺激參數(shù)后，在最佳刺激條件下，利用免疫組織化學(xué)的方法觀察大鼠前庭內(nèi)側(cè)核、丘腦束旁核、黑質(zhì)和紋狀體區(qū)c

5、-Fos蛋白表達(dá)的變化;尋找最佳的刺激參數(shù)和變化最明顯的蛋白表達(dá)，并記錄下來(lái)。
　　結(jié)果:
　　1.最佳刺激參數(shù)是電流強(qiáng)度:1mA;頻率:50Hz;延遲:0.1ms;波寬:1.0ms;時(shí)間:3min。
　　2.通過(guò)最佳刺激參數(shù)刺激大鼠外周前庭器官后，統(tǒng)計(jì)觀察對(duì)前庭神經(jīng)內(nèi)側(cè)核區(qū)c-FOS蛋白表達(dá)的影響。刺激外周前庭器官后，前庭神經(jīng)內(nèi)側(cè)核區(qū)c-Fos蛋白陽(yáng)性神經(jīng)元表達(dá)數(shù)目由對(duì)照組的5.72增加到34.80，經(jīng)過(guò)SPSS軟件

6、分析，組間比較差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，n=6);
　　3.刺激外周前庭器官束旁核區(qū)c-Fos蛋白表達(dá)明顯增多（由對(duì)照組7.93增加到85.76），與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，n=6);
　　4.刺激外周前庭器官也能使紋狀體區(qū)c-Fos蛋白表達(dá)(37.92)明顯多于對(duì)照組(4.98)(P＜0.05，n=6);
　　5.刺激外周前庭器官對(duì)黑質(zhì)區(qū)c-Fos蛋白表達(dá)沒(méi)有明顯影響，無(wú)顯著性差異(P＜0