RAE、VPA對LPS海馬C-fos蛋白表達(dá)影響及意義的研究.pdf

1、第一部分慢性LPS的制備及影響因素
　　 目的：通過建立慢性LPS大鼠模型，觀察大鼠行為學(xué)表現(xiàn)、模型鼠點(diǎn)燃成功率、死亡率及其影響因素，為在該模型中進(jìn)行癲癇相關(guān)的基礎(chǔ)研究和抗癲癇藥物療效的評價(jià)和篩選提供經(jīng)濟(jì)可靠的研究載體。方法：50只清潔級雄性SD大鼠，除6只正常對照組外，其余參與造模，予以腹腔注射氯化鋰127mg·kg-1（3mmol·kg-1），18h～24h后，給予匹羅卡品30mg·kg-1腹腔注射。結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)造模成功率8

2、6％，死亡率14％，點(diǎn)燃成功并存活的大鼠中出現(xiàn)SRS率占75％。結(jié)論：用鋰-匹羅卡品制備SD大鼠慢性癲癇模型，匹羅卡品的用量經(jīng)多劑量預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示為30mg·kg-1時(shí)，鋰-匹羅卡品大鼠慢性癲癇模型成功率更高，動物的死亡率更低，操作簡單，是一種較穩(wěn)定、經(jīng)濟(jì)的慢性LPS模型，適用于抗癲癇藥物的篩選研究。
　　 第二部分 RAE、VPA對LPS海馬C-fos蛋白表達(dá)的影響及意義
　　 目的：通過LPS慢性點(diǎn)燃大鼠模型觀察致癇

3、大鼠C-fos蛋白免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞在RAE不同劑量級、VPA干預(yù)后不同研究時(shí)間點(diǎn)海馬CA1、CA3及DG區(qū)的表達(dá)，探索C-fos蛋白在癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用和RAE抗癲癇效應(yīng)的可能作用機(jī)制。方法：（1）清潔級健康成年雄性SD大鼠126只，除正常對照組6只外，余120只均為造模成功后存活的LPS大鼠；（2）按隨機(jī)化原則分為模型組、VPA干預(yù)組、RAEL干預(yù)組、RAEM干預(yù)組、RAEH干預(yù)組（各24只），再按不同時(shí)間點(diǎn)分為4個(gè)亞組，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)

4、6只大鼠；（3）分組后正常對照組、模型對照組分別灌胃給予等容積的生理鹽水，其余各組灌胃給予不同劑量的RAE溶液；（4）采用免疫組織化學(xué)和圖像分析技術(shù)方法觀察實(shí)驗(yàn)鼠海馬CA1、CA3及DG區(qū)C-fos免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá)。結(jié)果：（1）模型組大鼠海馬區(qū)C-fos免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞在1d、7d表達(dá)顯著增加，28d恢復(fù)并接近正常對照組表達(dá)水平。（2）RAE中高劑量、VPA干預(yù)后對C-fos免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá)均有顯著下調(diào)，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

5、（P<0.05），但三者之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；低劑量組（RAE干預(yù)組）表達(dá)有顯著下調(diào)趨勢，但與模型組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：（1）LPS模型在急、慢性期均存在顯著的海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)損傷，可見到海馬各區(qū)C-fos的表達(dá)呈雙相性改變，這種變化可能與模型鼠癲癇的自限性反復(fù)發(fā)作機(jī)制和C-fos蛋白的正反饋抑制有關(guān)；（2）RAE中高劑量顯著下調(diào)LPS模型鼠海馬神經(jīng)元C-fos免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá)，推測可能是其重要的抗