P2X受體在小鼠下丘腦LHRH神經元的表達.pdf

1、在細胞、分子和系統(tǒng)水平有可靠的證據證實胞外ATP通過活化嘌呤能受體在生理和病理過程中發(fā)揮重要作用。P2X受體是ATP門控離子通道，它介導了快速(10ms以內)選擇性通透陽離子(Na+，K+和Ca2+)的過程。到目前為止已經從哺乳動物中克隆出7種不同的P2X亞型，它們可以同或異聚體的形式組裝成ATP活化的離子通道。嘌呤能P2X受體在下丘腦各處都有表達，同時LHRH神經元廣泛地分布于整個下丘腦，并投射至正中隆起，在那里這些神經元從軸突末梢將

2、LHRH釋放至下丘腦門脈系統(tǒng)。但是截至目前還沒有P2X受體在LHRH神經元表達的相關報道。
　　 本實驗我們用免疫熒光組織化學雙標技術研究了ATP門控陽離子通道家族成員(P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5和P2X6)在小鼠下丘腦LHRH神經元的表達情況。由于P2X7受體功能比較特異，可以作為非選擇性通道，故本實驗沒有對P2X7受體的表達進行研究。
　　 本研究發(fā)現LHRH-免疫陽性(-ir)神經元主要定位于

3、終板血管器(OVLT)周圍的區(qū)域，而LHRH-ir纖維主要定位于OVLT和正中隆起(ME)。我們觀察到OVLT周圍區(qū)域神經元的不同亞群表達P2X2、P2X4、P2X5和P2X6受體，而沒有觀察到P2X1和P2X3受體表達。而在發(fā)現大量LHRH-ir纖維的ME區(qū)和OVLT區(qū)，只看到類似于LHRH-ir纖維的P2X6受體免疫反應陽性纖維。
　　 我們用免疫熒光組織化學雙標技術觀察到所有LHRH-ir神經元分別也被P2X2、P2X4、

4、P2X5和P2X6受體抗體染色，但它們的免疫染色強度有所不同，用不同抗體進行免疫染色發(fā)現它們的強度順序是P2X6＞P2X4＞P2X2＞P2X5。所有LHRH-ir纖維也有高強度的P2X6抗體標記，只有一些LHRH-ir纖維，尤其是胞體附近的被P2X2抗體標記，但是ME區(qū)和OVLT區(qū)的LHRH-ir纖維并沒被P2X2受體抗體標記，幾乎沒有LHRH-ir纖維標記有P2X4或P2X5受體抗體。
　　 我們又用免疫熒光組織化學雙標技術研

5、究了小鼠前腦中P2X受體蛋白和LHRH-ir神經元的共定位。這項研究首次證實了P2X2、P2X4、P2X5和P2X6表達于LHRH神經元，從而為小鼠前腦水平嘌呤能系統(tǒng)和LHRH系統(tǒng)之間可能的功能性相互作用奠定了堅實的神經解剖學基礎。
　　 簡而言之，本研究發(fā)現在LHRH神經元胞體和軸突末梢有不同P2X受體亞單位的表達。首次發(fā)現P2X2、P2X4、P2X5和P2X6表達于LHRH神經元胞體，而P2X2和P2X6也表達于LHRH神經