P2X受體在小鼠下丘腦LHRH神經(jīng)元的表達(dá).pdf

1、在細(xì)胞、分子和系統(tǒng)水平有可靠的證據(jù)證實(shí)胞外ATP通過(guò)活化嘌呤能受體在生理和病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用。P2X受體是ATP門控離子通道，它介導(dǎo)了快速(10ms以內(nèi))選擇性通透陽(yáng)離子(Na+，K+和Ca2+)的過(guò)程。到目前為止已經(jīng)從哺乳動(dòng)物中克隆出7種不同的P2X亞型，它們可以同或異聚體的形式組裝成ATP活化的離子通道。嘌呤能P2X受體在下丘腦各處都有表達(dá)，同時(shí)LHRH神經(jīng)元廣泛地分布于整個(gè)下丘腦，并投射至正中隆起，在那里這些神經(jīng)元從軸突末梢將

2、LHRH釋放至下丘腦門脈系統(tǒng)。但是截至目前還沒有P2X受體在LHRH神經(jīng)元表達(dá)的相關(guān)報(bào)道。
　　 本實(shí)驗(yàn)我們用免疫熒光組織化學(xué)雙標(biāo)技術(shù)研究了ATP門控陽(yáng)離子通道家族成員(P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5和P2X6)在小鼠下丘腦LHRH神經(jīng)元的表達(dá)情況。由于P2X7受體功能比較特異，可以作為非選擇性通道，故本實(shí)驗(yàn)沒有對(duì)P2X7受體的表達(dá)進(jìn)行研究。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)LHRH-免疫陽(yáng)性(-ir)神經(jīng)元主要定位于

3、終板血管器(OVLT)周圍的區(qū)域，而LHRH-ir纖維主要定位于OVLT和正中隆起(ME)。我們觀察到OVLT周圍區(qū)域神經(jīng)元的不同亞群表達(dá)P2X2、P2X4、P2X5和P2X6受體，而沒有觀察到P2X1和P2X3受體表達(dá)。而在發(fā)現(xiàn)大量LHRH-ir纖維的ME區(qū)和OVLT區(qū)，只看到類似于LHRH-ir纖維的P2X6受體免疫反應(yīng)陽(yáng)性纖維。
　　 我們用免疫熒光組織化學(xué)雙標(biāo)技術(shù)觀察到所有LHRH-ir神經(jīng)元分別也被P2X2、P2X4、

4、P2X5和P2X6受體抗體染色，但它們的免疫染色強(qiáng)度有所不同，用不同抗體進(jìn)行免疫染色發(fā)現(xiàn)它們的強(qiáng)度順序是P2X6＞P2X4＞P2X2＞P2X5。所有LHRH-ir纖維也有高強(qiáng)度的P2X6抗體標(biāo)記，只有一些LHRH-ir纖維，尤其是胞體附近的被P2X2抗體標(biāo)記，但是ME區(qū)和OVLT區(qū)的LHRH-ir纖維并沒被P2X2受體抗體標(biāo)記，幾乎沒有LHRH-ir纖維標(biāo)記有P2X4或P2X5受體抗體。
　　 我們又用免疫熒光組織化學(xué)雙標(biāo)技術(shù)研

5、究了小鼠前腦中P2X受體蛋白和LHRH-ir神經(jīng)元的共定位。這項(xiàng)研究首次證實(shí)了P2X2、P2X4、P2X5和P2X6表達(dá)于LHRH神經(jīng)元，從而為小鼠前腦水平嘌呤能系統(tǒng)和LHRH系統(tǒng)之間可能的功能性相互作用奠定了堅(jiān)實(shí)的神經(jīng)解剖學(xué)基礎(chǔ)。
　　 簡(jiǎn)而言之，本研究發(fā)現(xiàn)在LHRH神經(jīng)元胞體和軸突末梢有不同P2X受體亞單位的表達(dá)。首次發(fā)現(xiàn)P2X2、P2X4、P2X5和P2X6表達(dá)于LHRH神經(jīng)元胞體，而P2X2和P2X6也表達(dá)于LHRH神經(jīng)