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文檔簡介
1、目的:早期腦損傷(Early brain injury,EBI)在蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoidhemorrhage,SAH)發(fā)病機(jī)制中扮演著重要作用。神經(jīng)元凋亡是參與SAH后EBI的重要病理機(jī)制。前期研究表明,富氫生理鹽水(Hydrogen-rich Saline,HS)能抑制神經(jīng)元凋亡,從而減輕SAH后的EBI。氫氣在EBI中具體的抗凋亡效應(yīng)的分子機(jī)制至今仍未被闡明。在本研究中,我們旨在闡述氫氣是否能通過調(diào)節(jié)Akt/GSK
2、3β信號通路的活性來抑制神經(jīng)元凋亡,進(jìn)而減輕SAH后的EBI。
方法:Sprague-Dawley大鼠(n=85)被隨機(jī)分成以下幾組:假手術(shù)組(n=17),SAH組(n=17),SAH+生理鹽水組(n=17),SAH+HS組(n=17)和SAH+HS+Ly294002組(n=17)。HS或者等量的生理鹽水立即被注射到術(shù)后的大鼠體內(nèi),8小時(shí)后重復(fù)注射一次。PI3K抑制劑Ly294002用來抑制上述的信號通路。SAH后24小時(shí)進(jìn)行
3、死亡率計(jì)算、神經(jīng)功能評分及SAH分級。應(yīng)用Western blot量化分析Akt、pAkt、GSK3β、pGSK3β和caspase-3等蛋白。通過末端脫氧核糖核酸染色法(TUNEL)和神經(jīng)元特異性核蛋白(NeuN)來檢測神經(jīng)元凋亡。用免疫組化來闡明神經(jīng)元凋亡和pAkt或者pGSK3β之間的關(guān)系。
結(jié)果:HS能顯著地減少神經(jīng)元凋亡,從而改善SAH大鼠的神經(jīng)功能缺失。HS能使在神經(jīng)元表達(dá)的pAkt和pGSK3β水平顯著地上調(diào)了。
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