氫氣飽和生理鹽水對(duì)大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：蛛網(wǎng)膜下腔出血（Subarachnoid hemorrhage。SAH）是神經(jīng)外科臨床常見(jiàn)的致死、致殘率極高的腦血管疾病。腦血管痙攣（Cerebral vasospasm,CVS）是蛛網(wǎng)膜下腔出血最常見(jiàn)的高危并發(fā)癥之一，其發(fā)生率高達(dá)30℅~90℅。到目前為止，臨床上尚無(wú)療效肯定的治療方法，且有治療效果的藥物治療時(shí)間窗及對(duì)腦功能的保護(hù)機(jī)制亦不明確。近期研究發(fā)現(xiàn)氫氣可作為一種新型選擇性抗氧化劑在缺血缺氧性腦病、缺血再灌注損傷、炎癥性疾

2、病等疾病中有治療作用，其作用機(jī)制可能與抗炎、抗氧化等有關(guān)。另外研究發(fā)現(xiàn)氫氣飽和生理鹽水（Hydrogen saturated saline。HS）腹腔注射大鼠可以明顯緩解蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣，改善腦功能，但是HS治療血管痙攣的時(shí)間窗及其療效尚未得到進(jìn)一步的研究。因此，本研究擬利用大鼠動(dòng)物模型上，腹腔注射HS，觀察HS對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣的緩解作用及對(duì)腦功能的保護(hù)作用，進(jìn)一步探討HS治療的時(shí)間窗及其療效。
　　方法：選

3、取SD大鼠55只，通過(guò)建立大鼠枕大池二次注血蛛網(wǎng)膜下腔出血模型，并隨機(jī)分為三組：氫氣飽和生理鹽水（SAH+HS）治療組（n=25）、生理鹽水（SAH+NS）治療組（n=25）、正常(Normal)對(duì)照組（n=5）。蛛網(wǎng)膜下腔出血模型組又進(jìn)一步平均分為1d組、2d組、3d組、5d組、7d組(每小組5只)，動(dòng)物造模成功后每天分別腹腔注射5ml/kg劑量氫氣飽和生理鹽水及等量的生理鹽水，按術(shù)前分組于手術(shù)后1d、2d、3d、5d、7d處死大鼠，

4、灌注取腦。觀察術(shù)后大鼠神經(jīng)功能評(píng)分改變、基底動(dòng)脈（近、中、遠(yuǎn)端）HE染色組織病理學(xué)變化及尼氏染色海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)及數(shù)量的變化。神經(jīng)功能評(píng)分采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。術(shù)后第1d氫氣鹽水治療組、生理鹽水治療組和正常對(duì)照組基底動(dòng)脈血管直徑及厚度使用單因素ANOVA分析，進(jìn)一步使用最小顯著性差異法（least-significant difference。LSD）檢驗(yàn)進(jìn)行組間兩兩比較。術(shù)后第2d、3d、5d、7d氫氣生理鹽水治療組和生理鹽水治療組基底

5、動(dòng)脈血管直徑及厚度數(shù)據(jù)采用兩樣本t檢驗(yàn)。采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)并分析數(shù)據(jù)，以p﹤0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　SAH+HS治療組與SAH+NS治療組跟正常對(duì)照組相比神經(jīng)功能評(píng)分明顯降低（中位數(shù)評(píng)分，p﹤0.05），提示SAH后大鼠存在腦功能損害；而SAH+HS治療組與SAH+NS治療組神經(jīng)功能評(píng)分相比明顯增高（p﹤0.05），提示 HS治療可以減輕腦功能的損害。術(shù)后第1d氫氣鹽水治療組、生理鹽水

6、治療組和正常對(duì)照組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用單因素ANOVA分析組間比較，結(jié)果顯示存在顯著差異（F=3.53。p=0.04），進(jìn)一步使用最小顯著性差異法（least-significant difference。LSD）檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，提示氫氣鹽水治療組和生理鹽水治療組的基底動(dòng)脈直徑小于正常對(duì)照組（648.35±19.32VS997.41±36.58,p=0.03和621.03±40.23VS997.41±36.58,p=0.04）；基底動(dòng)脈厚度大

7、于正常對(duì)照組（25.38±0.85VS7.85±0.17。p=0.047和29.16±1.90VS7.85±0.17,p=0.007）。提示建模成功。氫氣生理鹽水治療組和生理鹽水治療組在術(shù)后第3d各項(xiàng)數(shù)據(jù)采用兩樣本 t檢驗(yàn)，血管直徑比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（856.82±55.68 VS320.12±10.84，t=2.32,p=0.043），血管壁厚度比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（22.99±0.99 VS53.61±2.49，t=2.81,p=

8、0.02）。而建模后第2d、5d、7d采用t檢驗(yàn)各項(xiàng)數(shù)據(jù)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。Nissl染色結(jié)果顯示，正常對(duì)照組神經(jīng)元胞體較大、胞質(zhì)藍(lán)染、核圓呈空泡狀，膠質(zhì)細(xì)胞呈細(xì)小藍(lán)色顆粒狀。蛛網(wǎng)膜下腔出血模型組神經(jīng)元萎縮深染、細(xì)胞間隙增寬、部分神經(jīng)元消失，壞死區(qū)膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯。術(shù)后第2d和5d氫氣飽和生理鹽水治療組正常神經(jīng)元數(shù)目明顯多于生理鹽水治療組，神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)尼氏體增多，且生理鹽水治療組神經(jīng)元細(xì)胞水腫明顯。
　　結(jié)論：