iNOS在蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中作用的研究.pdf

1、目的:建立SD大鼠自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血模型,通過檢測iNOS的變化和神經(jīng)系統(tǒng)病理生理、形態(tài)學(xué)變化的關(guān)系,進一步分析探討iNOS在SAH后EBI的發(fā)生機制。
　　方法:1.通過視交叉池注入自體動脈血的方法,建立SD大鼠自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血動物模型。2.參照Kaoutzanis等的大鼠行為學(xué)評分標準,對SD大鼠造模后進行神經(jīng)行為學(xué)評分。3.HE染色鑒定動物模型。4.ELISA法測神經(jīng)元烯醇化酶(NSE);TUNEL法檢測海馬區(qū)神經(jīng)元細

2、胞凋亡情況。5.RT-PCR技術(shù)對iNOSmRNA、Caspase-3mRNA進行半定量分析;Western-Blot技術(shù)檢測iNOS、Caspase-3的蛋白表達。
　　結(jié)果:1.在本模型中,利用HE染色發(fā)現(xiàn)實驗組大鼠蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)大量紅細胞,實驗組大鼠出現(xiàn)明顯的神經(jīng)功能的缺失,與空白組存在顯著差異。2.SD大鼠在成功建立自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血后,實驗組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元細胞確實發(fā)生了凋亡,在6h開始升高,與空白組和對照組相比有統(tǒng)計學(xué)

3、意義(P<0.01),在24h時間段到達高峰,48h開始下降,與空白組和對照組比較仍具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。72h與空白組和對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。3.SD大鼠在成功建立自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血后,實驗組大鼠腦組織懸液中神經(jīng)元烯醇化酶(NSE)在6h開始升高,與空白組和對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),在24h時間段到達高峰,48h開始下降,與空白組和對照組比較仍具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。72h與空白組

4、和對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。4.SD大鼠在成功建立自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血后,大鼠腦組織中iNOS基因表達在6h開始升高,在24h時間段到達高峰,空白組和對照組iNOS的基因表達量較低。Caspase-3基因表達量在時相上與iNOS趨于一致。
　　結(jié)論:1.SD大鼠在蛛網(wǎng)膜下腔出血后海馬區(qū)確實存在神經(jīng)元細胞的凋亡,這可能是引起了大鼠神經(jīng)功能的缺損以及早起腦損傷的一個重要因素。2.神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)的變化可以