人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子及其配體1在腸道病毒71型感染所致手足口病中的表達(dá).pdf

1、目的:探討EV71感染手足口病患兒血清中的神經(jīng)細(xì)胞粘附分子(CD56+)及其配體1(CD171)的表達(dá)情況，從而推測EV71感染手足口病患兒在固有免疫階段NK細(xì)胞在機(jī)體，特別是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的表達(dá)情況，進(jìn)一步對NK細(xì)胞在EV71感染手足口病患兒的固有免疫階段免疫應(yīng)答情況及在EV71免疫逃逸過程中，特別是對EV71感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)過程中，是否發(fā)揮作用及其原因做出推論，從分子免疫學(xué)角度為EV71感染人體后早期病理生理過程，特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)

2、病理生理變化提供客觀事實(shí)依據(jù)，從病理生理學(xué)的角度解釋EV71感染手足口病患兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的出現(xiàn)原因，為預(yù)測EV71感染手足口病患兒疾病嚴(yán)重程度，特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染嚴(yán)重程度及預(yù)后評估開拓新的思路，為未來應(yīng)用生物制劑進(jìn)行特效治療EV71感染提供了新的思路及理論基礎(chǔ)。
　　方法:參考患兒年齡段、發(fā)病時間、是否進(jìn)行院前處理、出生史、喂養(yǎng)史、生長發(fā)育史、既往病史、預(yù)防接種史、家族史、近期傳染病接觸史、居住地情況、居住環(huán)境情況、飲食習(xí)

3、慣、作息時間、家庭經(jīng)濟(jì)情況、看護(hù)家屬受教育程度等條件選擇EV71感染手足口病患兒共60例。入選患兒均為1-3歲，發(fā)病時間1-3日，未進(jìn)行院前處理，整體男女性別比例1∶1，無特殊個人史、既往史及家庭情況。依照《腸道病毒71型(EV71)感染重癥病例臨床救治專家共識（2011年版）》將60例EV71感染的手足口病患兒分為重型病例、普通病例組，另選同一采樣時期，相同年齡段，相似個人情況、家族情況及家庭環(huán)境的正常健康兒童30例為對照組，所有兒童

4、均空腹4-6小時采集靜脈血樣本，采集血樣手法相同，應(yīng)用的采集管及采血針均為同一廠家同一批次，采集過程中患兒無劇烈哭鬧，均為一次采集成功，所有EV71感染手足口病患兒均在治療前采集血樣，所有采集血樣均為正常靜脈血樣標(biāo)本，樣本離心后無溶血情況，離心后30分鐘內(nèi)采集血清0.5毫升，嚴(yán)格按照CD56+、CD171試劑盒使用說明書，將血清樣本進(jìn)行零下20℃冷藏，無反復(fù)凍融操作，檢測前血清復(fù)溫至室溫，采用ELISA雙抗體夾心法測定技術(shù)檢測各組靜脈血

5、清CD56+、CD171水平，依照CD56+、CD171試劑盒附帶的標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果繪制檢測曲線，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各檢測樣品檢測物濃度。采用spss13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以(x)±s表示，組間比較用秩和檢驗(yàn)和單因素方差分析。
　　結(jié)果:重型病例患兒CD56+（24.67±2.41ng/L）及普通病例患兒CD56+（36.53±0.92ng/L）較健康患兒CD56+（40.10±1.31ng/L）水平降低，各組之間兩兩進(jìn)行

6、比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。重型病例患兒CD171（16.53±1.70ng/L）及普通病例患兒CD171（24.05±0.69ng/L）較健康患兒CD171(27.25±0.71ng/L)水平降低，各組之間兩兩進(jìn)行比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:EV71感染手足口病患兒存在NK細(xì)胞異常情況，EV71感染手足口病患兒NK細(xì)胞較正常健康兒童數(shù)量減少，活性降低，且與患兒疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)NK細(xì)胞較正常健康兒童數(shù)量減少，活性

7、降低，并且與患兒出現(xiàn)相應(yīng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀呈正相關(guān)，初步提示NK細(xì)胞在EV71感染手足口病患兒的固有免疫階段呈數(shù)量減少，活性降低，影響NK細(xì)胞的免疫應(yīng)答（包括抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用、天然細(xì)胞毒性及產(chǎn)生細(xì)胞因子能力），從而降低機(jī)體對EV71感染免疫防御能力。NK細(xì)胞數(shù)量及活性下降，在EV71感染機(jī)體后免疫逃逸過程中發(fā)揮一定輔助作用，特別是對中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染產(chǎn)生影響。從分子免疫學(xué)角度提示NK細(xì)胞活性降低，合成、產(chǎn)生細(xì)胞因子能力下降，為

8、EV71早期感染人體后各種細(xì)胞因子水平變化提供了NK細(xì)胞相關(guān)的論據(jù)，特別是為中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理生理變化提供了分子免疫學(xué)水平的理論支持，以細(xì)胞因子作為出發(fā)點(diǎn)，從病理生理學(xué)的角度揭示了EV71感染手足口病患兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀出現(xiàn)的原因，為預(yù)測EV71感染手足口病患兒的全身免疫應(yīng)答情況，預(yù)測手足口病的嚴(yán)重程度，特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的嚴(yán)重程度及疾病預(yù)后評估提供了小數(shù)據(jù)樣本研究的實(shí)例，為大數(shù)據(jù)樣本進(jìn)一步深入研究開拓了思路，提供了相關(guān)聯(lián)的理論支持，