獨(dú)一味顆粒對四氯化碳聯(lián)合高脂飲食所致肝纖維化大鼠肝組織Smad3、Smad7表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本課題在前期實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)上，通過觀察Smad3和Smad7在肝纖維化大鼠肝組織的表達(dá)水平變化，進(jìn)一步探討?yīng)氁晃额w?？垢卫w維化可能的作用機(jī)制，以期為獨(dú)一味的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法：雄性SD大鼠78只，隨機(jī)分為6組，即空白組、模型組、秋水仙堿組、獨(dú)一味顆粒高、中、低劑量組，每組13只。空白組皮下注射等劑量橄欖油，余各組采用CCl4油劑皮下注射聯(lián)合高脂飼料法，均為3天/次，制備大鼠肝纖維化模型。造模第一天開始，用高（2.

2、4g/kg）、中(1.2g/kg)、低(0.6g/kg)劑量的獨(dú)一味顆粒及秋水仙堿（0.045g/kg）灌胃干預(yù)治療,模型組與空白組給予等量的生理鹽水灌胃，共8周。于實(shí)驗(yàn)第8周末處死大鼠，抽取股動脈血用放射免疫法檢測肝纖維化大鼠血清的肝纖維化四項(xiàng)指標(biāo)：透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid,HA)、層粘連蛋白（Laminin,LN）、IV型膠原（Collagen-IV,IV-C)、III型前膠原（Procollagen typeIII

3、,PCIII)。HE染色、Masson染色觀察大鼠肝臟組織同一部位的肝臟組織病理改變和肝纖維化程度，采用免疫組化法和實(shí)時熒光定量技術(shù)檢測肝組織中Smad3、Smad7mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.血清中肝纖維化敏感指標(biāo)（HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C）：模型組大鼠血清中含量顯著高于空白組(P<0.01)；與模型組比較，給藥組均能顯著降低大鼠血清中的含量(P<0.01)；獨(dú)一味顆粒治療組與秋水仙堿組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.0

4、5)。
　　2.肝組織病理形態(tài)學(xué)改變：空白組肝組織結(jié)構(gòu)完好，肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富，匯管區(qū)未見炎性細(xì)胞浸潤及纖維組織增生；與空白組比較，模型組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重，肝組織有大量的炎性細(xì)胞浸潤、肝細(xì)胞壞死及脂肪變性；與模型組比較，各給藥組的肝小葉節(jié)結(jié)構(gòu)存在，排列欠整齊，僅見少量炎性細(xì)胞浸潤，無明顯纖維增生，未見纖維間隔形成。
　　3.大鼠肝組織Smad3、Smad7免疫組化顯示：空白組大鼠肝組織間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)可見少量 Smad3、Sma

5、d7基礎(chǔ)性表達(dá)；與空白組比較，模型組大鼠肝組織中Smad3、Smad7表達(dá)數(shù)目明顯增多，呈棕黃色胞漿型分布；與模型組比較，各給藥組大鼠肝組織中Smad3、Smad7在匯管區(qū)有少量表達(dá)，陽性染色程度較輕。
　　4.大鼠肝組織Smad3、Smad7mRNA表達(dá)水平：與空白組比較，模型組大鼠肝組織Smad3mRNA的表達(dá)明顯增強(qiáng)，Smad7mRNA的表達(dá)顯著減弱，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組比較,各劑量給藥組與秋水仙堿組S