壯肝逐瘀煎對(duì)大鼠肝Smad4-Smad7表達(dá)的影響.pdf

1、目的:研究壯肝逐瘀煎對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化的療效及對(duì)TGF-β/Smad信號(hào)通路調(diào)節(jié)基因Smad4、Smad7表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討壯肝逐瘀煎抗肝纖維化的作用機(jī)制。
　　 方法:選用健康清潔級(jí)Wistar大鼠120只，雌雄各半，體重220～250g，隨機(jī)取16只作為正常對(duì)照組（A組）。剩余大鼠采用CCL4復(fù)合因素法進(jìn)行肝纖維化造摸。給予大鼠高脂低蛋白食物（以玉米面為飼料，加0.5％膽固醇，實(shí)驗(yàn)第1、2W加20％豬油），10％酒精為

2、唯一飲料，皮下注射CCL4(第1次注射100％CCL4油劑5ml/kg體重，以后每隔3天皮下注射40％ CCL4油劑3ml/kg體重）。為了防止肝臟自然修復(fù)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，各組于用藥開(kāi)始后仍每周注射40％ CCL4油劑3ml/kg體重1次（A組除外）。于第4W末，隨機(jī)處死造摸大鼠8只證實(shí)HF形成后做相關(guān)檢測(cè)。將剩余96只造模大鼠隨機(jī)分為病理模型組（B組）、壯肝逐瘀煎顆粒劑大劑量（成人20倍量）、中劑量（成人10倍量）、小劑章（成人5倍

3、量）治療組（C，D，E組）、秋水仙堿對(duì)照組(F組）、大黃蟅蟲(chóng)丸對(duì)照組（G組）共6組，每組16只。造模4W后各組分別予以灌胃給藥，A組正常飼料喂養(yǎng)，灌胃與治療組同容積的生理鹽水;B組灌胃與治療組同體積的生理鹽水;C,D,E組給予壯肝逐瘀煎免煎顆粒劑，劑量分別為10g/kg體重、5g/kg體重、2.5g/kg體重;F組灌服秋水仙堿100μg/kg體重;G組灌服大黃蟅蟲(chóng)丸1.5g/kg體重。以上各組灌胃液體量為10ml/kg體重，均給藥1次/

4、天，其濃度及等效劑量按體表面積折算，共給藥12W.A，B，C，D，E，F(xiàn),G各組分別于用藥治療后6W,12W，禁食12h，隨機(jī)選取8只大鼠稱(chēng)重后處死，剖取肝臟、并取肝臟右葉相同部位固定于10％甲醛中，石蠟包埋、切片，分別行HE，免疫組化染色。
　　 結(jié)果:1.壯肝逐瘀煎能夠明顯減輕肝纖維化大鼠肝組織炎癥活動(dòng)及肝纖維化程度，具有較強(qiáng)的保肝、抗肝纖維化作用(P＜0.01)。
　　 2.免疫組化結(jié)果表明，模型組大鼠肝組織中Sm

5、ad4表達(dá)明顯增強(qiáng)、Smad7表達(dá)明顯減少。壯肝逐瘀煎高劑量、中劑量組與模型組比較肝組織中Smad7的含量顯著性升高(P＜0.01)、Smad4的含量顯著降低(P＜0.01);經(jīng)壯肝逐瘀煎治療后的肝纖維化大鼠，肝組織結(jié)構(gòu)改善，Smad4表達(dá)下調(diào)、Smad7表達(dá)上調(diào)，表明壯肝逐瘀煎對(duì)TGF-β/Smad信號(hào)通路具有一定的干預(yù)作用。
　　 結(jié)論:壯肝逐瘀煎能夠明顯降低肝纖維化大鼠TGF-β/Smad信號(hào)傳導(dǎo)通路中Smad4的表達(dá)，并