壯肝逐瘀煎對大鼠肝Smad4-Smad7表達(dá)的影響.pdf

1、目的:研究壯肝逐瘀煎對實驗性大鼠肝纖維化的療效及對TGF-β/Smad信號通路調(diào)節(jié)基因Smad4、Smad7表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討壯肝逐瘀煎抗肝纖維化的作用機(jī)制。
　　 方法:選用健康清潔級Wistar大鼠120只，雌雄各半，體重220～250g，隨機(jī)取16只作為正常對照組（A組）。剩余大鼠采用CCL4復(fù)合因素法進(jìn)行肝纖維化造摸。給予大鼠高脂低蛋白食物（以玉米面為飼料，加0.5％膽固醇，實驗第1、2W加20％豬油），10％酒精為

2、唯一飲料，皮下注射CCL4(第1次注射100％CCL4油劑5ml/kg體重，以后每隔3天皮下注射40％ CCL4油劑3ml/kg體重）。為了防止肝臟自然修復(fù)對實驗結(jié)果的影響，各組于用藥開始后仍每周注射40％ CCL4油劑3ml/kg體重1次（A組除外）。于第4W末，隨機(jī)處死造摸大鼠8只證實HF形成后做相關(guān)檢測。將剩余96只造模大鼠隨機(jī)分為病理模型組（B組）、壯肝逐瘀煎顆粒劑大劑量（成人20倍量）、中劑量（成人10倍量）、小劑章（成人5倍

3、量）治療組（C，D，E組）、秋水仙堿對照組(F組）、大黃蟅蟲丸對照組（G組）共6組，每組16只。造模4W后各組分別予以灌胃給藥，A組正常飼料喂養(yǎng)，灌胃與治療組同容積的生理鹽水;B組灌胃與治療組同體積的生理鹽水;C,D,E組給予壯肝逐瘀煎免煎顆粒劑，劑量分別為10g/kg體重、5g/kg體重、2.5g/kg體重;F組灌服秋水仙堿100μg/kg體重;G組灌服大黃蟅蟲丸1.5g/kg體重。以上各組灌胃液體量為10ml/kg體重，均給藥1次/

4、天，其濃度及等效劑量按體表面積折算，共給藥12W.A，B，C，D，E，F(xiàn),G各組分別于用藥治療后6W,12W，禁食12h，隨機(jī)選取8只大鼠稱重后處死，剖取肝臟、并取肝臟右葉相同部位固定于10％甲醛中，石蠟包埋、切片，分別行HE，免疫組化染色。
　　 結(jié)果:1.壯肝逐瘀煎能夠明顯減輕肝纖維化大鼠肝組織炎癥活動及肝纖維化程度，具有較強(qiáng)的保肝、抗肝纖維化作用(P＜0.01)。
　　 2.免疫組化結(jié)果表明，模型組大鼠肝組織中Sm

5、ad4表達(dá)明顯增強(qiáng)、Smad7表達(dá)明顯減少。壯肝逐瘀煎高劑量、中劑量組與模型組比較肝組織中Smad7的含量顯著性升高(P＜0.01)、Smad4的含量顯著降低(P＜0.01);經(jīng)壯肝逐瘀煎治療后的肝纖維化大鼠，肝組織結(jié)構(gòu)改善，Smad4表達(dá)下調(diào)、Smad7表達(dá)上調(diào)，表明壯肝逐瘀煎對TGF-β/Smad信號通路具有一定的干預(yù)作用。
　　 結(jié)論:壯肝逐瘀煎能夠明顯降低肝纖維化大鼠TGF-β/Smad信號傳導(dǎo)通路中Smad4的表達(dá)，并