HPLC-ESI-MSn快速鑒定植物中活性成分.pdf

1、液相色譜聯(lián)用及電噴霧多級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)(HPLC-ESI-MSn)綜合了色譜的強(qiáng)大分離性能和質(zhì)譜的優(yōu)越定性功能，同時(shí)具備靈敏度高、分析快捷等優(yōu)點(diǎn)，即使在樣品稀少的情況下也能進(jìn)行有效的分析，再與已知化合物的常規(guī)裂解規(guī)律進(jìn)行比對(duì)，便能夠快速識(shí)別已知化合物，獲得未知化合物的豐富的結(jié)構(gòu)信息，現(xiàn)已成為了對(duì)藥用植物進(jìn)行快速分析鑒定的最佳工具。本論文運(yùn)用這一技術(shù)，成功地對(duì)中藥小春花全株(Botrychium ternatum)、杭白菊花序(Chrysa

2、nthemum morifoliumRamat)和佛手中藥飲片(Citrus medicaL.var.sarcodactylis Swingle)這三種不同類型植物的不同部位進(jìn)行了液質(zhì)聯(lián)用分析，分別根據(jù)它們的電噴霧質(zhì)譜多級(jí)碎裂行為識(shí)別并鑒定出了這三種藥用植物中活性成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
　　本論文的主要內(nèi)容包括以下三部分。
　　第一部分。對(duì)液相色譜及電噴霧多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)行了探討并歸納了黃酮及黃酮苷的特征性裂解行為。在此基

3、礎(chǔ)上運(yùn)用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)并參考文獻(xiàn)資料，對(duì)中草藥小春花進(jìn)行了液質(zhì)聯(lián)用分析，根據(jù)電噴霧質(zhì)譜的多級(jí)裂解數(shù)據(jù)及文獻(xiàn)資料，快速地推理并鑒定了小春花中的28個(gè)黃酮及黃酮苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)。兩個(gè)黃酮苷元分別為為山奈酚(kaempferol)和槲皮素(quercetin)，涉及的取代糖基有葡萄糖(glucose)、甘露糖(mannose)、鼠李糖(rhamnose)、木糖(xylose)、乙酰化葡萄糖(acetylglucose)和香豆?；咸烟?coumar

4、oylglucose)，其中有6個(gè)黃酮苷是之前傳統(tǒng)的分離純化方法沒有分析得到的新化合物。
　　第二部分?，F(xiàn)代醫(yī)藥研究中，對(duì)天然植物的活性成分的提取、樣品的制備，即提取條件的選用是極為重要的。因此，在本章節(jié)的研究中，我們選用了當(dāng)今比較熱門的微波輔助離子液法來選擇性萃取杭白菊中的黃酮苷。并采用響應(yīng)面優(yōu)化法對(duì)微波輔助-離子液萃取法的提取時(shí)間、固液比、離子液濃度及微波功率這四個(gè)提取條件進(jìn)行優(yōu)化，以最少的實(shí)驗(yàn)操作，得到最優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。最后

5、，再采用高效液相質(zhì)譜及電噴霧多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)目標(biāo)提取物進(jìn)行快速地分離分析鑒定。我們采用此方法一共從杭白菊花序中提取到了十個(gè)黃酮苷，分別是金合歡素(acacetin)、山奈素(kaemferide)、芹菜素(apigenin)和木犀草素(lutedin)與蕓香糖(rutinose)、葡萄糖(glucose)、葡萄糖醛酸(glucuronic acid)和新橙皮糖(neohesperidose)形成的氧取代的黃酮糖苷，證明了微波輔助-離子