殺菌植物篩選及其活性成分鑒定.pdf

1、農(nóng)藥作為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要投入物質(zhì),對(duì)農(nóng)業(yè)發(fā)展和人類糧食供給作出了巨大的貢獻(xiàn).然而化學(xué)農(nóng)藥的過度使用引發(fā)了人們對(duì)環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品安全的憂慮.研究開發(fā)低毒、高效、環(huán)境友好的新型生物農(nóng)藥迫在眉睫.我國(guó)有豐富的藥用植物資源,以它們?yōu)檠芯繉?duì)象,篩選出對(duì)植物病原真菌抑制效果較好的藥用植物,在活性追蹤指導(dǎo)下,對(duì)其主要抑菌成分進(jìn)行分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定,為生物農(nóng)藥的開發(fā)提供先導(dǎo)化合物.本文對(duì)28種藥用植物丙酮提取物抑制常見植物病原真菌效果進(jìn)行篩選,對(duì)抑菌活性較好

2、,研究較少的藥用植物虎杖的主要抑菌成分在活性追蹤指導(dǎo)下進(jìn)行分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定.研究結(jié)果如下:
　　1.根據(jù)中藥藥理選取有清熱解毒、驅(qū)風(fēng)利濕以及驅(qū)蟲、殺蟲等功效的28種藥用植物,用丙酮浸提,以瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、辣椒疫霉(Phytophthora capsici)、尖鐮孢菌(Fusarium oxysporium)、茄鐮孢菌(Fusarium solani)、灰葡萄孢(Botrytis cine

3、rea)、禾谷鐮孢菌(Fusarium graminearum)6種植物病原真菌為供試菌株,采用菌絲生長(zhǎng)法對(duì)28種藥用植物的丙酮提取物進(jìn)行了抑菌活性的測(cè)定.結(jié)果表明:丁香(Eugenia caryophyllata)對(duì)6種植物病原真菌的抑制率均達(dá)100％,烏梅(Armeniaca mume)、百部(Stemona sessilifolia)和木香(Aucklandia lappa)對(duì)5種植物病原真菌的抑制率均在70％以上.利用孢子萌發(fā)法

4、對(duì)抑菌效果好的藥用植物進(jìn)一步研究,發(fā)現(xiàn)這幾種藥用植物對(duì)灰葡萄孢孢子萌發(fā)抑制率均在90％以上.
　　2.應(yīng)用菌絲生長(zhǎng)法,測(cè)定虎杖乙醇提取物對(duì)6種植物病原真菌的抑菌活性。粗提物濃度為1 g/L時(shí),對(duì)6種植物病原真菌均有一定的抑菌活性,其中對(duì)P. aphanidermatum和P. capsici效果較好,抑制率為40.78％和40.65％.EC50實(shí)驗(yàn)表明,虎杖乙醇提取物對(duì)P. capsici的抑菌活性最好,EC50為1.18 g/L

5、,對(duì)F. solani的活性次之,EC50為1.34 g/L.將虎杖乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,并對(duì)各萃取物進(jìn)行活性測(cè)定.其中虎杖乙酸乙酯萃取物對(duì)6種植物病原真菌活性最高,且均高于乙醇浸膏,說明抑菌活性物質(zhì)主要存在于乙酸乙酯萃取物中.
　　3.在活性追蹤指導(dǎo)下,通過薄層層析、硅膠柱層析和Sephadex LH-20葡聚糖凝膠柱層析對(duì)虎杖乙酸乙酯萃取物抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行分離純化,得到編號(hào)為REd-5-a和REd-6-

6、d兩種主要的抑菌活性物質(zhì).REd-5-a對(duì)P. capsici和F. oxysporium的EC50分別為0.17 g/L和7.99 g/L.REd-6-d對(duì)P. capsici和F. oxysporium的EC50分別為0.009 g/L和0.013 g/L.REd-5-a為橙色針狀結(jié)晶,幾乎不溶于水,溶于乙醇及堿溶液.REd-6-d為白色晶體,難溶于水,易溶于乙醇,丙酮等有機(jī)溶劑.應(yīng)用UV、IR、1H-NMR和13C-NMR等有機(jī)波