紅豆杉多糖對免疫低下小鼠相關(guān)免疫功能的影響.pdf

1、背景:近年來，研究表明許多復(fù)方、單味中藥及其單體被證實具有免疫增強(qiáng)或免疫調(diào)節(jié)作用，主要物質(zhì)基礎(chǔ)是植物多糖，且多糖的免疫學(xué)研究是熱點，并取得很大的成績。紅豆杉已經(jīng)是世界瀕危珍稀植物，素有“植物黃金”之稱[1]，是第四紀(jì)冰川后的珍貴物種，其樹皮是提取抗腫瘤藥紫杉醇的原材料，隨著近年來紫杉醇的大量提取，紅豆杉被大量砍伐，引起人們對其充分利用的重視。
　　本課題組在近10年的臨床應(yīng)用及研究中發(fā)現(xiàn)了在紅豆杉的枝、葉中含有豐富的“紅豆杉多糖”

2、，在與浙江大學(xué)及省內(nèi)企業(yè)合作已成功從中提取分離出“紅豆杉多糖”（已獲國家發(fā)明專利授權(quán):03129421.9），并在近年中逐步完成毒理學(xué)、藥效學(xué)、藥代學(xué)研究;發(fā)現(xiàn)該多糖具有抗腫瘤[2]、抗糖尿病[3]作用;還具有有效干預(yù)心肌缺血再灌注損傷等生物學(xué)特性和功能[4-6]，但目前國內(nèi)外罕見對紅豆杉多糖的免疫學(xué)的研究。
　　因此，本課題組認(rèn)為對其進(jìn)行深入系統(tǒng)研究有著重大的科研價值和臨床意義。本實驗擬通過紅豆杉多糖對免疫功能低下的小鼠模型進(jìn)行

3、干預(yù)，觀察紅豆杉多糖對免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子的影響，探討紅豆杉多糖對免疫功能低下小鼠相關(guān)免疫功能的影響。
　　第一章 紅豆杉多糖對免疫低下小鼠CD3+、CD19+等淋巴細(xì)胞的影響
　　目的:探討紅豆杉多糖對免疫低下小鼠免疫功能的影響。方法:昆明小鼠45只隨機(jī)分成為空白組，氫化可的松模型組，紅豆杉多糖低、中、高劑量組，并以猴頭菇多糖為陽性對照組，每組8只。空白組皮下注射生理鹽水，其余各組皮下注射氫化可的松0.2mg/kg隔天注射，

4、共14天，制備小鼠免疫低下模型?？瞻捉M和模型組灌NS200mg/kg，陽性組予猴頭菇多糖11 mg/kg灌胃[7]，紅豆杉多糖低、中、高劑量組分別按250，500，1000mg/kg，連續(xù)14d灌胃紅豆杉多糖，末次給藥后12h;小鼠眼眶取血，流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠血CD3+、CD4+、CD8+、CD19+細(xì)胞數(shù)量。結(jié)果:(1)氫化可的松模型組與空白組對比，CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞及CD19+B淋巴細(xì)胞均明顯降低(P＜0.01)

5、;(2)紅豆杉多糖各劑量組與模型組對比，CD3+、CD4+、CD8+、CD19+淋巴細(xì)胞均有所增加(P＜0.05），CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞以紅豆杉多糖高、中劑量組增加明顯(P＜0.01);CD19+以高劑量組增加明顯(P＜0.01），提示紅豆杉多糖可能通過增加CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)目調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫;增加CD19+B淋巴細(xì)胞的數(shù)目調(diào)節(jié)B淋巴介導(dǎo)的體液免疫增強(qiáng)免疫低下小鼠免疫功能;(3)紅豆杉

6、中劑量組與模型組比較，中劑量組能降低CD4+/CD8+比值，有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);高、低劑量組與模型組比較有降低CD4+/CD8+比值的趨勢，但差異無顯著性（P＞0.05），提示紅豆杉多糖可能通過調(diào)節(jié)CD4+/CD8+的比例改善氫化可的松導(dǎo)致的免疫調(diào)節(jié)功能紊亂。結(jié)論:紅豆杉多糖可作為一種免疫調(diào)節(jié)劑，具有調(diào)節(jié)氫化可的松導(dǎo)致的小鼠免疫紊亂現(xiàn)象;它可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫及體液免疫來增強(qiáng)免疫低下小鼠的免疫功能。
　　第二章 紅豆杉多

7、糖對免疫低下小鼠IL-2、INF-γ活性的影響
　　目的:探討紅豆杉多糖改善小鼠免疫功能的機(jī)制。方法:昆明小鼠48只隨機(jī)分成為空白組，氫化可的松模型組，紅豆杉多糖低、中、高劑量組，并以猴頭菇多糖為陽性對照組，每組8只?？瞻捉M皮下注射生理鹽水，其余各組皮下注射氫化可的松0.2mg/kg隔天注射，共14天，制備小鼠免疫低下模型?？瞻捉M和模型組灌NS200mg/kg，陽性組予猴頭菇多糖11 mg/kg灌胃，紅豆杉多糖低、中、高劑量組分別

8、按250，500，1000mg/kg，連續(xù)14d灌胃紅豆杉多糖，末次給藥后12h;小鼠眼眶靜脈取血，末次給藥后12h，小鼠眼眶取血，酶聯(lián)免疫法檢測小鼠血清中細(xì)胞免疫因子IL-2、IFN-γ;結(jié)果:氫化可的松模型組與空白組比較，血清中IL-2、IFN-γ含量均明顯降低(P＜0.01)。紅豆杉多糖各劑量組與模型組比較，血清中IL-2含量均有所增加，以高、中劑量組均明顯增高(P＜0.01);紅豆杉多糖各劑量組與模型組比較，除紅豆杉多糖低劑量組