瑣瑣葡萄多糖、黃酮的提取及其對(duì)小鼠免疫功能的影響.pdf

1、目的：利用植物化學(xué)的方法提取瑣瑣葡萄的兩種活性成分瑣瑣葡萄多糖（VTP）和瑣瑣葡萄總黃酮（VTF），進(jìn)行定性定量分析，并分別研究?jī)煞N活性物質(zhì)對(duì)免疫低下模型小鼠免疫功能的影響。方法：（1）經(jīng)熱水提取、乙醇沉淀、Sevage法除蛋白、水相透析提取純化得VTP，采用理化反應(yīng)、紅外光譜和氣相色譜對(duì)提取物進(jìn)行鑒定和初步結(jié)構(gòu)分析，苯酚-硫酸法測(cè)定多糖含量，間羥基聯(lián)苯法測(cè)定VTP中半乳糖醛酸含量；采用乙醇回流提取、有機(jī)溶劑萃取、大孔吸附樹(shù)脂富集、不同

2、濃度的乙醇-水梯度洗脫提取分離得VTF，紫外分光光度法測(cè)定總黃酮含量。（2）應(yīng)用環(huán)磷酰胺制備免疫低下小鼠模型，以不同劑量的VTP和VTF作為受試物灌胃給藥30天，分別研究VTP和VTF對(duì)免疫低下模型小鼠脾臟及胸腺指數(shù)、抗體分泌細(xì)胞功能、血清溶血素水平和脾臟淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的影響。結(jié)果：（1）建立了綜合應(yīng)用水提醇沉法、醇提法、有機(jī)溶劑萃取法及大孔吸附樹(shù)脂富集、乙醇-水梯度洗脫一步提取分離VTP和VTF的工藝；瑣瑣葡萄提取物VTpMolis

3、h反應(yīng)呈陽(yáng)性，紅外吸收光譜在3417、2916、1747、1633、1423、1105 cm-1處表現(xiàn)為典型的多糖吸收峰；氣相色譜檢測(cè)結(jié)果表明VTP主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，摩爾比為0.27:0.97:0.90:2.23:0.83:1.40。硫酸咔唑反應(yīng)呈陽(yáng)性，提示VTP提取樣品中含糖醛酸，含量為38.17%，RSD為1.65%；VTP粗提物中多糖含量為20.68%，RSD為 1.93%，純化物中多糖含量

4、為36.11%，RSD為1.29%；VTF提取物中總黃酮含量為35.28%，RSD為1.42%。（2）與模型組相比，VTP中劑量組、VTF低、中、高劑量組均可增加脾臟的重量（P＜0.05），VTP和VTF各劑量組對(duì)胸腺指數(shù)的影響與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；與模型組相比，VTP低、中、高劑量組，VTF低、中劑量組均可有效促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化功能（P＜0.01）；除VTF高劑量組外，其他各組均能改善小鼠抗體生成細(xì)胞的功能（