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文檔簡介
1、本課題通過檢測急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)小鼠模型血清中腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素(interleukin,IL)-10、IL-12水平變化、脾臟中樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)的分化以及胰腺組織病理改變,探討以下幾個(gè)問題:1.一定濃度范圍內(nèi)的尼古丁可以顯著減低急性胰腺炎的炎癥反應(yīng)程度;2.一定濃度范圍內(nèi)的尼古丁可以降低AP小鼠的死亡率
2、;3.尼古丁可能是通過誘導(dǎo)DCs向CD11 c1owCD45RBhigh DCs的分化從而改善急性胰腺炎的預(yù)后。
選取BALB/C小鼠100只,按照隨機(jī)分配原則將動(dòng)物分為正常對照組、AP組、尼古丁干預(yù)組(0.1 mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg),再隨機(jī)分成0h、12h、24h、48 h、96 h五個(gè)亞組,每個(gè)亞組4只小鼠。分兩次腹腔注射8%L-精氨酸(40mg/kg),間隔1小時(shí),建立小鼠急性胰腺炎模型,對照組
3、按同樣方法注射0.5ml生理鹽水。于每個(gè)時(shí)間點(diǎn)摘除眼球取血,取胰腺組織做病理檢測。用流式細(xì)胞儀分析脾臟中DCs亞群表面共刺激分子CD40、CD80、CD86及主要組織相容性復(fù)合物(MHC)-Ⅱ的表達(dá),血清中細(xì)胞因子IL-10、IL-12以及TNF-α的表達(dá)水平按ELISA試劑盒說明書進(jìn)行檢測。此外,另取96只小鼠,隨機(jī)分成四組,每組24只。在模型制作前1h腹腔注射等量的生理鹽水和不同濃度尼古丁(0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3
4、 mg/kg),每12小時(shí)觀察小鼠死亡率,并詳細(xì)記錄小鼠死亡情況,最長觀察時(shí)間為8天。
尼古丁明顯增加了小鼠脾臟CD11 clowCD45RBhigh DCs的數(shù)量,并呈現(xiàn)一種劑量依賴關(guān)系;與AP組相比,尼古丁刺激后AP小鼠血清中細(xì)胞因子IL-12以及TNF-α的表達(dá)水平明顯減低,而IL-10的水平卻得到提高,并且呈劑量依賴關(guān)系(p<0.05);尼古丁的干預(yù)明顯減弱了AP中胰腺組織的損害;0.1 mg/kg、0.2 mg/kg
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