EGCG對小鼠急性胰腺炎治療作用的實驗研究.pdf

1、目的：通過檢測急性胰腺炎(AP)小鼠血清中血清淀粉酶(AMS)、腫瘤壞死因子(TNF-a)、白介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)的含量及胰腺組織中核因子(N F-κ B)表達、胰腺組織病理學(xué)觀察，探討EGCG對雨蛙素誘導(dǎo)小鼠AP的治療效果及作用機制，為臨床治療提供理論依據(jù)。
　　方法：balb/c雄性小鼠54只，清潔級，體重22～25g，編號為1012142，購于河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。小鼠隨機分為以下三組(18只/組)：(

2、1)A組為對照組，腹腔注射生理鹽水(10ml/kg)7次，每次間隔1 h。(2)B組為模型組(18只/組)，通過腹腔注射雨蛙素(Cn5mg/l，10ml/kg)的方法制備--清潔級小鼠予以腹腔注射雨蛙素(50μ g/kg)，每小時注射1次，共7次；(3)C組藥物治療組，在制備小鼠AP造模成功后分別于1h、3h、6h腹腔注射EGCG(25mg/kg)。各實驗小組根據(jù)小鼠處死時間點分為3個亞組，即造模成功后8h、12h、24h亞組(6只/亞

3、組)。按預(yù)定時間點處死小鼠后，切取胰腺，對胰腺大體標(biāo)本進行觀察，留取部分胰腺組織制備切片分別進行HE染色，觀察組織學(xué)變化及組織病理學(xué)評分和免疫組化測定N F-κ B表達；留取血清，對血清中淀粉酶、TNF-α、IL-6、MDA的含量進行測定。其中數(shù)據(jù)利用spss13.0分析。
　　結(jié)果：1.胰腺形態(tài)學(xué)觀察：①大體標(biāo)本觀察：A組胰腺組織未見明顯變化，無充血、水腫、胰腺壞死及腹水；B組胰腺組織蒼白、水腫，脂肪組織表面散在點狀皂化斑，腹腔

4、內(nèi)清澈的黃色腹水；C組胰腺組織局部蒼白、水腫，未發(fā)現(xiàn)明顯皂化斑及腹水。②光鏡下觀察：A組胰腺腺泡排列規(guī)則，未見明顯變化；B組胰腺間質(zhì)不同程度的充血、水腫，腺泡水腫、排列紊亂，伴有炎癥細胞浸潤；C組胰腺間質(zhì)輕度水腫，小葉間隔增寬，其內(nèi)炎癥細胞及紅細胞散在分布。③胰腺組織病理學(xué)評分：B組與A組相應(yīng)時間點相比，間質(zhì)水腫、炎細胞及紅細胞間質(zhì)內(nèi)分布明顯，組織病理評分增高，差異有顯著性(P<0.05)；B組各亞組間隨時間延長組織損傷加重，差異具有顯

5、著性(P<0.05)，C組與B組相應(yīng)時間點相比，胰腺間質(zhì)水腫、炎細胞浸潤明顯改善，胰腺損傷的組織病理學(xué)評分降低，其差異有顯著性(P<0.05)。2.N F-κ B的測定結(jié)果：B組各時間點與A組相應(yīng)時間點相比胰腺中N F-κ B的表達明顯增高，其差異具有顯著性(P<0.05)；B組間隨時間點延長N F-κ B的表達逐漸降低；與B組相比，C組在造模后8h、12h胰腺組織的N F-κ B的表達明顯降低，其差異具有顯著性(P<0.05)。3.M

6、DA含量測定結(jié)果：與A組比較，B組在造模后8h、12h、24h血清MDA均有明顯地升高，其差異具有顯著性(P<0.05)。與B組比較，C組在造模成功后8h、12h、24h血清MDA均有明顯地降低，其差異具有顯著性(P<0.05)。4.血清淀粉酶(AMS)測定結(jié)果：與A組比較，B組在造模后8h、12h、24h血清AMS均明顯地升高，其差異具有顯著性(P<0.05)。與B組比較，C組在造模成功后8h、12h、24h血清AMS均明顯地降低，其

7、差異具有顯著性(P<0.05)。5.TNF-α的測定結(jié)果：與A組比較，B組在造模后8h、12h、24h血清TNF-α均明顯地升高，其差異具有顯著性(P<0.05)。與B組比較，C組在造模成功后8h、12h、24h血清TNF-α均明顯地降低，其差異具有顯著性(P<0.05)。6.IL-6的測定結(jié)果：與A組比較，B組在造模后8h、12h、24h血清IL-6均明顯地升高，其差異具有顯著性(P<0.05)。與B組比較，C組在造模成功后8h、12

8、h、24h血清IL-6均明顯地降低，其差異具有顯著性(P<0.05)。7.相關(guān)性分析：血清MDA含量與胰腺組織病理學(xué)評分相關(guān)系數(shù)r=0.754，P<0.05；此結(jié)果表明，隨著MDA含量的增加，胰腺組織損傷程度越嚴重。
　　結(jié)論：雨蛙素腹腔注射是誘導(dǎo)小鼠AP模型的經(jīng)典制作方法。通過對小鼠AP的實驗研究，證實了AP可引起N F-κ B、TNF-α等細胞因子及氧自由基含量升高，從而加重胰腺組織損傷。本實驗結(jié)果表明，EGCG作為一個抗氧化