酵母青霉互作產(chǎn)紅色素研究.pdf

1、作為食品添加劑的天然色素品種多樣、原料豐富、有益健康、絕大多數(shù)無副作用，安全性高。目前，我國色素生產(chǎn)與國外色素生產(chǎn)相比，普遍存在成本較高，提取效率較低的現(xiàn)象；許多色素研究工作只停留于書本理論知識(shí)，投入實(shí)踐生產(chǎn)的比例較??；在植物色素資源開發(fā)利用當(dāng)中，許多單位只注重開發(fā)，不注重保護(hù)，致使資源枯竭。因此開發(fā)新型的天然色素，是色素行業(yè)發(fā)展的首要問題。 本研究從產(chǎn)紅色素的混合菌群中分離出2株菌(HS07A和HS07B)，經(jīng)過培養(yǎng)試驗(yàn)得知兩

2、菌混合培養(yǎng)發(fā)酵才能產(chǎn)生紅色素，而單獨(dú)培養(yǎng)任何一株菌，均不能產(chǎn)生紅色素。依據(jù)其形態(tài)、生理生化特性及rDNA片段測(cè)序同源性分析，結(jié)果表明HS07A屬于半知菌亞門(Deuteromycotina)，芽孢菌綱(Blastomycetes)、隱球酵母目(Crytococcales)、隱球酵母科(Crytococcaceae)、假絲酵母屬(Candida Berkh)、熱帶假絲酵母(C。tropicalis)；菌株HS07B青霉屬(Penicill

3、ium)。 將兩個(gè)菌種單獨(dú)接種和交叉劃線接種培養(yǎng)，結(jié)果在劃線平板上兩菌交叉生長部位沿青霉菌(HS07B)菌絲生長的方向上產(chǎn)生紅色素。此外，以查氏培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，做營養(yǎng)限制實(shí)驗(yàn)，當(dāng)C源為1 g/L時(shí)，單獨(dú)培養(yǎng)青霉菌也可產(chǎn)生紅色素，且該紅色素和混合產(chǎn)生的紅色素為同種色素，判定紅色素是由青霉菌產(chǎn)生的。進(jìn)一步將HS07A和HS07B與其他已知酵母和霉菌兩兩按酵母-霉菌混合接種培養(yǎng)，結(jié)果只有HS07A和HS07B的混合產(chǎn)生紅色素，其它組合不

4、產(chǎn)生紅色素。進(jìn)行濾膜隔離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，上清濾液互加實(shí)驗(yàn)，可以看出，色素的產(chǎn)生并不是因?yàn)榫w接觸和代謝產(chǎn)物相互作用產(chǎn)生的；追加還原糖實(shí)驗(yàn)，得出紅色素的產(chǎn)生和培養(yǎng)基中還原糖的含量有關(guān)。 紫外-可見分光光度計(jì)全波段掃描提取得到的色素，確定色素最大吸收峰為510nm。將提取的紅色素進(jìn)行梯度稀釋，于510nm波長測(cè)量吸光度，建立吸光度(A)與色素濃度(C)關(guān)系曲線C(mg/mL)=1-4494A+0.0121(R2=0.9998)。該紅色素性

5、質(zhì)分析得知可為水醇等多種溶劑溶解，其抗氧化，抗紫外照射能力，熱穩(wěn)定性，抗酸堿性均較強(qiáng)。是一種具有開發(fā)利用的潛能的色素。 對(duì)該兩株菌混合發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化后，得出500mL三角瓶裝量60mL培養(yǎng)基、29℃、160rpm、初始pH=5、接種比例1：1和先接種HS07B培養(yǎng)7h后再接種HS07A混合培養(yǎng)，能夠產(chǎn)生更多的色素，比優(yōu)化前提高了15％。并進(jìn)行15L發(fā)酵罐的放大試驗(yàn)，結(jié)果在總發(fā)酵62h分離提取色素，色素產(chǎn)量達(dá)到最大為6.19mg