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文檔簡介
1、目的:脈絡叢上皮細胞除了分泌腦脊髓液,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中其它作用知之甚少,對綠色熒光裸小鼠脈絡叢上皮細胞進行原代培養(yǎng),旨在開發(fā)出-種有自然熒光示蹤特征的工具細胞,并對其生物學特性進行研究,為進一步研究提供便利。
方法:解剖顯微鏡下提取裸小鼠脈絡叢組織,機械分離成細胞團,在盛有20%胎牛血清DMEM(F12)培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板中培養(yǎng),3天后第1次換液,之后每2天半量換液,1周后每3天換液1次,細胞貼壁后用CCK-8及Ki-67測增
2、殖活性,倒置熒光顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度,TTR、S100,GFAP,alpha-SMA和Nestin免疫細胞化學熒光染色對培養(yǎng)細胞類型進行鑒定。
結果:培養(yǎng)的脈絡叢上皮細胞穩(wěn)定表達綠色熒光(EGFP),發(fā)出明亮的綠色熒光,在形態(tài)上呈多邊形,伸展寬廣,胞體大,幾乎每個細胞都高表達脈絡叢上皮細胞特異標志TTR,但不表達GFAP,alpha-SMA和Nestin,并且具有較強的增殖活性,在體外可連續(xù)傳代7代。
結論:本
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