體外角膜緣上皮細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)比較.pdf

1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文體外角膜緣上皮細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)比較姓名：沈健申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：馬翔20040601細(xì)胞間隙進(jìn)行比較。A組細(xì)胞分別于傳代于96孔板，Al組(有羊膜載體)、A2組(無羊膜載體)；B組細(xì)胞分別于傳代于96孔板，Bl組(有羊膜載體)，B2組(無羊膜載體)，每組設(shè)4個(gè)平行孔，傳代培養(yǎng)的角膜緣上皮細(xì)胞，采用MTT法分別測定l、3、5、7天的OD值，計(jì)算細(xì)胞增殖率，并進(jìn)行組問比較。細(xì)胞增殖率=(實(shí)驗(yàn)組OD值

2、一對(duì)照組OD值)／對(duì)照組OD值100％。比較懸浮細(xì)胞組和組織塊培養(yǎng)傳代后的細(xì)胞增殖能力及有羊膜組與無羊膜組的細(xì)胞增殖率的差別。結(jié)果：倒置顯微鏡觀察，懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法A組和組織塊培養(yǎng)法B組擴(kuò)增的角膜緣上皮細(xì)胞均能在羊膜上單層生長。A組，角膜緣上皮細(xì)胞生長均勻，排列緊密，呈多角形，細(xì)胞之間伸出突起相互接觸，4—5天傳一代，無梭形成纖維細(xì)胞的污染。B組，2—3天大部分組織塊邊緣有細(xì)胞移行向外長出生長暈，細(xì)胞呈多角形、圓形，細(xì)胞之間相互連接。7—

3、9天角膜緣上皮細(xì)胞傳一代較A組傳代時(shí)間長，且有少量梭形成纖維細(xì)胞夾雜于上皮細(xì)胞之間，當(dāng)取下組織塊時(shí)，存在多處無細(xì)胞空白區(qū)，不能形成連續(xù)的細(xì)胞層。透射電鏡下觀察，同一放大倍數(shù)視野下A組的角膜緣上皮細(xì)胞之間的間隙小于B組的細(xì)胞間隙。并且A、B兩組培養(yǎng)的角膜緣上皮細(xì)胞之間均有橋粒連接，A組細(xì)胞的橋粒均數(shù)為371094個(gè)(IFlO)；而B組細(xì)胞的橋粒均數(shù)為0244028個(gè)(n=10)，兩組比較且差異具有顯著性臍0001)。MTT法比較傳代細(xì)胞的

4、增殖率，Al組細(xì)胞培養(yǎng)后l、3、5、7天細(xì)胞增殖率分別是232％、294％、457％、427％；BI組在傳代后培養(yǎng)后l、3、5、7天細(xì)胞增殖率分別是209％、257％、415％、408％，Al、Bl相應(yīng)各組間比較差別均有顯著性0o05)，AI組細(xì)胞增殖率高于相應(yīng)的B1組。A2組在傳代后培養(yǎng)后l、3、5、7天細(xì)胞增殖率分別是194％、223％、378％、31％。B2組在傳代后培養(yǎng)后1、3、5、7天細(xì)胞增殖率分別是158％、205％、335