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1、目的:研究鬼針草水提物對(duì)雄激素缺乏性干眼大鼠眼表和淚腺的保護(hù)機(jī)制。
方法:健康雌性Wistar大鼠24只,實(shí)驗(yàn)分為四組:正常對(duì)照組、生理鹽水組、模型組、鬼針草治療組,每組各6只。正常對(duì)照組:不做任何處理。生理鹽水組:每100g體重0.5ml生理鹽水灌胃,每日給藥一次,連續(xù)4周。模型組:非那雄胺(1.16mg/kg/天)灌胃,每天一次,連續(xù)4周。鬼針草治療組:除非那雄胺組灌胃外,另以每100g體重0.5ml的鬼針草水提取物(濃度
2、0.1g/mL)灌胃,每天一次,連續(xù)4周。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)收集和標(biāo)本采集時(shí)間為:各實(shí)驗(yàn)組分別于實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)后7天、14天、21天及28天行酚紅棉線、淚膜破裂時(shí)間、角膜熒光素染色評(píng)分檢查,并在實(shí)驗(yàn)第28天取大鼠淚腺及角膜組織行細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)檢測(cè),根據(jù)細(xì)胞因子抗體芯片檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步行淚腺Western blot分析,并于光學(xué)顯微鏡下觀察淚腺及角膜組織形態(tài)。
結(jié)果:①非那雄胺組大鼠較對(duì)照組淚液分泌減少、淚膜破裂時(shí)間縮短、高熒光素染色評(píng)
3、分,淚腺有顯著的炎細(xì)胞浸潤(rùn)。鬼針草治療組大鼠與非那雄胺組對(duì)比,淚液分泌增加、淚膜破裂時(shí)間延長(zhǎng)、角膜熒光素染色評(píng)分降低,并且淚腺結(jié)構(gòu)較完整、幾乎未見明顯的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。②利用細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,非那雄胺組較對(duì)照組淚腺中22種細(xì)胞因子的表達(dá)水平顯著改變,其中大多數(shù)細(xì)胞因子是炎癥因子和趨化因子。15種細(xì)胞因子(IL-1β,IL-6,IFN-γ,Fas L,GM-CSF, TNF-α,IL-4,IL-10,CNTF,B7-2/Cd
4、86,Leptin,MMP-8,TIMP-1,L-selection及ICAM-1)的表達(dá)明顯增加。在高表達(dá)的細(xì)胞因子中,IL-1β,IL-6,GM-CSF及TNF-α為促炎因子,IL-4和IL-10為抗炎因子。上述細(xì)胞因子在鬼針草組表達(dá)明顯低于非那雄胺組。鬼針草組與對(duì)照組相比,細(xì)胞因子在淚腺中的表達(dá)無(wú)顯著差異。非那雄胺組大鼠角膜中6種細(xì)胞因子的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組,包括Fsa L,IL-13,PDGF-AA,B7-2/Cd86,TI
5、MP-1及Prolactin R。鬼針草組角膜中細(xì)胞因子的表達(dá)與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異。③用Western blot分析淚腺中的高表達(dá)細(xì)胞因子(B7-2/Cd86,MMP-8,TIMP-1,IL-1β,IL-4,IL-6,IL-10,F(xiàn)asL及TNF-α)結(jié)果顯示,非那雄胺組中MMP-8,IL-1β,IL-4,IL-6,IL-10,F(xiàn)asL及TNF-α表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。B7-2/CD86和TIMP-
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