光譜法研究三種頭孢類藥物與胰蛋白酶、牛轉(zhuǎn)鐵蛋白之間的相互作用.pdf

1、近年來，人類疾病的發(fā)生率逐年增加，各種藥物在生活中也起到了不容忽視的作用，為了更好的了解藥物的藥理、藥效和靶向運輸，藥物與蛋白相互作用的研究課題已成為人們關(guān)注的重點。本文以胰蛋白酶和牛轉(zhuǎn)鐵蛋白為載體蛋白，用多種方法研究了硫酸頭孢匹羅、頭孢哌酮鈉、頭孢尼西鈉與蛋白的相互作用。
　　本研究分為五個部分：第一章闡述了幾種研究蛋白與小分子藥物相互作用的常用方法，并對胰蛋白酶和轉(zhuǎn)鐵蛋白進行了簡單的概述。對立題思路、研究內(nèi)容以及藥物與蛋白相互

2、作用的展望進行了簡單的介紹。第二章用多種光譜法和分子對接法研究了胰蛋白酶和硫酸頭孢匹羅之間的相互作用。結(jié)果表明，硫酸頭孢匹羅使胰蛋白酶發(fā)生熒光猝滅，猝滅機理為靜態(tài)猝滅，結(jié)合位點數(shù)接近于1。猝滅曲線表明色氨酸殘基和酪氨酸殘基都參加了反應(yīng)。同步熒光光譜法進一步表明，二者主要的結(jié)合位點更接近于色氨酸殘基。對熱力學(xué)參數(shù)的計算表明，二者之間主要作用力為靜電引力，分子對接表明二者之間的作用力為靜電引力，其中還有氫鍵作用。胰蛋白酶與硫酸頭孢匹羅之間的

3、距離小于7nm，表明從胰蛋白酶到硫酸頭孢匹羅的能量轉(zhuǎn)移為非輻射能量轉(zhuǎn)移。熒光光譜法對Hill系數(shù)的研究表明，硫酸頭孢匹羅與胰蛋白酶之間存在負(fù)協(xié)同作用。第三章利用熒光光譜法，同步熒光光譜法和紫外吸收光譜法研究了硫酸頭孢匹羅和牛轉(zhuǎn)鐵蛋白之間的相互作用。測定了二者之間的猝滅常數(shù)、結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點等。通過對熱力學(xué)參數(shù)的計算，確定了硫酸頭孢匹羅和牛轉(zhuǎn)鐵蛋白之間的主要作用力類型以靜電引力為主。通過對Hill系數(shù)的計算，得出了硫酸頭孢匹羅和牛轉(zhuǎn)鐵蛋

4、白之間的協(xié)同作用為負(fù)協(xié)同作用。第四章通過熒光猝滅法和同步熒光光譜法對頭孢哌酮鈉與牛轉(zhuǎn)鐵蛋白的相互作用機理進行了研究。結(jié)果表明，兩種方法用相同的公式計算得到的二者的猝滅機理、結(jié)合位點，相互作用力以及協(xié)同作用基本一致。并且通過對Δλ=60nm和λex=295 nm的數(shù)據(jù)進行比較，得出同步熒光光譜法較之于傳統(tǒng)熒光光譜法有更高的靈敏度和準(zhǔn)確度。因此，同步熒光光譜法極大地豐富了小分子配體與蛋白之間相互作用機理的研究方法。第五章實驗在pH=7.4緩