四種蛋白酶與藥物的相互作用研究.pdf

1、生物大分子是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，擔(dān)負(fù)著生物體內(nèi)的各種功能。研究蛋白質(zhì)、酶等生物大分子與藥物小分子的相互作用，建立藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合的體外模型，有助于從分子水平上了解藥物在體內(nèi)的作用機(jī)制和藥代動(dòng)力學(xué)問題，對(duì)病理分析、臨床檢測(cè)、臨床用藥指導(dǎo)以及新藥開發(fā)等具有十分重要的意義。
　　 在前人工作的基礎(chǔ)上，采用熒光光譜法、共振光散射光譜法及紫外-可見吸收光譜法等在近似生理?xiàng)l件下研究了具有相似結(jié)構(gòu)的幾種藥物小分子與幾種蛋白酶的相互作用。本實(shí)驗(yàn)

2、有六部分主要內(nèi)容。
　　 第一章就蛋白酶與藥物小分子相互作用的研究方法及內(nèi)容等方面展開了評(píng)述，并提出了本文的研究?jī)?nèi)容。
　　 第二、三、四章研究了咖啡因、茶堿、氨茶堿等幾種甲基黃嘌呤類生物堿分別與胰蛋白酶、胃蛋白酶、溶菌酶結(jié)合反應(yīng)的熒光光譜行為，了解他們與蛋白酶的結(jié)合信息。研究了不同溫度下幾種生物堿對(duì)蛋白酶的熒光猝滅作用，通過Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk雙倒數(shù)方程計(jì)算得到動(dòng)態(tài)猝滅常數(shù)和靜態(tài)

3、猝滅常數(shù)，結(jié)果表明，兩者之間是一種因相互作用形成復(fù)合物而引起的靜態(tài)猝滅機(jī)制;根據(jù)熱力學(xué)常數(shù)(△H，△S，△G)判定他們的相互作用力的類型為疏水作用力和靜電引力;依據(jù)F(ǒ)ster能量轉(zhuǎn)移理論求得了兩者之間的結(jié)合距離均小于7nm，表明他們之間發(fā)生了非輻射能量轉(zhuǎn)移。同時(shí)通過紫外吸收、同步熒光、共振光散射光譜和三維熒光光譜法對(duì)幾種蛋白酶的構(gòu)象進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果均表明幾種酶的構(gòu)象發(fā)生了變化。幾種生物堿結(jié)構(gòu)上的差異導(dǎo)致與同一種酶的結(jié)合能力強(qiáng)弱也不

4、同。
　　 第五、六章研究了聯(lián)苯雙酯和它的結(jié)構(gòu)類似物對(duì)過氧化氫酶、胰蛋白酶的猝滅機(jī)制，結(jié)果表明以靜態(tài)猝滅為主;求得不同溫度下體系的猝滅常數(shù)及結(jié)合常數(shù);由熱力學(xué)參數(shù)推斷出分子間相互作用力的類型以疏水作用力為主。由F(ǒ)ster能量理論計(jì)算得到熒光供體-受體的結(jié)合距離r。紫外吸收、同步熒光、共振光散射和三維熒光光譜表明，聯(lián)苯雙酯及類似物與過氧化氫酶、胰蛋白酶的結(jié)合使蛋白酶的構(gòu)象發(fā)生了變化。最后比較了聯(lián)苯雙酯及類似物與過氧化氫酶、胰