miR-106b, miR-93靶向調控PTEN通過PI3K-Akt通路在乳腺癌進展中的研究.pdf

1、目的：通過比較miR-106b，miR-93在乳腺癌不同轉移能力細胞株中（MCF-7，MDA-M B-231）的表達差異，闡明miRN As在乳腺癌進展中的功能機制，為乳腺癌的早期診斷及治療提供新的指導方向。
　　方法：
　　（1）通過qRT-PCR技術檢測乳腺癌組織及細胞中miR-106b，miR-93的相對表達情況。
　?。?）通過基因預測軟件(TargetScan Human7.1 and microRNA.or

2、g)預測miR-106b，miR-93的靶基因并采用雙熒光素酶實驗在乳腺癌細胞中確證miRN As與靶向分子的調節(jié)關系。
　?。?）特異性上調MCF-7（人類乳腺癌低轉移株）中miR-106b，miR-93，下調MDA-M B-231（人類乳腺癌高轉移株）中miR-106b，miR-93，檢測上調及下調前后MCF-7，MDA-MB-231細胞中P TEN的變化及對功能實驗的影響。
　?。?）采用逆轉實驗檢測過表達PTEN對上

3、調miR-106b，miR-93的MCF-7細胞中 P I3K/Ak t通路及功能試驗的影響,同時檢測下調 P TEN對干擾miR-106b，miR-93的MDA-MB-231細胞中PI3K/Akt通路及功能試驗的影響。
　?。?）特異性下調MDA-MB-231細胞中的Ak t蛋白水平,檢測細胞功能試驗的變化。
　　結果：
　?。?）miR-106b，miR-93在乳腺癌組織及細胞中高表達。
　?。?）靶基因預測

4、軟件預測PTEN為miR-106b，miR-93的共同靶基因，雙熒光素酶實驗證實了此結果。
　?。?）特異性上調MCF-7細胞中miR-106b，miR-93，PTEN的表達量顯著下降且細胞的遷移、侵襲、增殖能力明顯增強。干擾 MDA-MB-231細胞中的miR-106b，miR-93，PTEN的表達顯著增強且細胞的遷移、侵襲、增殖能力下降。
　?。?）上調 PTEN逆轉了 MCF-7細胞中高表達的miR-106b，miR-

5、93對PI3K/Akt通路及功能實驗的作用。干擾PTEN的表達逆轉了在MDA-MB-231細胞中抑制miR-106b，miR-93所產生的影響。
　?。?）特異性下調MDA-M B-231細胞中Akt蛋白水平，細胞的遷移、侵襲及增殖能力明顯下降。
　　結論：
　　（1）miR-106b，miR-93在癌和癌旁，MCF-7和MDA-MB-231中的表達均具有顯著性差異，這種差異與乳腺癌的生物學行為具有相關性。