2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:探討Hedgehog(Hh)通路在佐劑性關(guān)節(jié)炎(AIA)大鼠軟骨中的表達(dá)及意義;及研究Hh通路阻斷劑環(huán)巴胺對(duì)AIA大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖凋亡的影響及抗凋亡機(jī)制。
  方法:弗氏完全佐劑誘導(dǎo)AIA大鼠模型;免疫組織化學(xué)(SP)法觀察Hh信號(hào)通路相關(guān)分子(Shh,Ptch1,Smo,Gli1)在AIA大鼠關(guān)節(jié)軟骨中的蛋白表達(dá)情況;實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)Shh,Ptch1,Smo,Gli1,II型膠原(COII)和蛋白聚糖(a

2、ggrecan)的mRNA表達(dá)水平;并且把Hh信號(hào)通路相關(guān)分子的mRNA水平與AIA大鼠關(guān)節(jié)軟骨損傷程度(OARSI評(píng)分,COII和aggrecan mRNA表達(dá)水平)進(jìn)行相關(guān)性分析。胰酶-膠原酶法分離培養(yǎng)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞;環(huán)巴胺體外給藥處理AIA大鼠軟骨細(xì)胞;MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖;DNA電泳、Hoechst染色、Annexin V-FITC/PI雙染檢測(cè)細(xì)胞凋亡;RT-PCR檢測(cè)Shh,Gli1,Ptch1,Bcl-2,Bax和Caspa

3、se-3 mRNA表達(dá)。
  結(jié)果:
  1.Hh通路在AIA大鼠軟骨中的表達(dá)及意義
  AIA大鼠造模成功的基礎(chǔ)上,Shh,Ptch1,Smo,Gli1的蛋白和基因水平在AIA大鼠中的表達(dá)均明顯高于正常組;AIA大鼠軟骨組織中的COII和aggrecan的mRNA表達(dá)水平則顯著降低;AIA大鼠中Shh,Ptch1,Smo,Gli1 mRNA的表達(dá)水平與OARSI評(píng)分明顯正相關(guān),與關(guān)節(jié)軟骨組織中COII,aggreca

4、n mRNA表達(dá)水平明顯負(fù)相關(guān);
  2.環(huán)巴胺對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖凋亡的影響及其抗凋亡機(jī)制
  環(huán)巴胺(0.08,0.4,2,10,50μmol/L)劑量依賴性地提高AIA大鼠軟骨細(xì)胞增殖;AIA組可見(jiàn)凋亡細(xì)胞DNA梯狀條帶,環(huán)巴胺(0.4,2,10μmol/L)給藥組的梯狀條帶明顯減少;AIA組存在核碎裂與染色質(zhì)固縮,環(huán)巴胺給藥組均勻藍(lán)色熒光的細(xì)胞數(shù)量增多;流式分析結(jié)果表明AIA大鼠軟骨細(xì)胞凋亡率顯著升高,

5、環(huán)巴胺明顯減少細(xì)胞凋亡率;與正常組相比,AIA大鼠軟骨細(xì)胞中Hh通路相關(guān)分子(Shh,Ptch1,Gli1)mRNA表達(dá)顯著升高,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表達(dá)顯著下降,而促凋亡基因Bax,Caspase-3 mRNA表達(dá)明顯升高,環(huán)巴胺體外給藥能抑制Hh通路過(guò)度活化,提高Bcl-2 mRNA表達(dá),并降低Bax,Caspase-3 mRNA表達(dá)。
  結(jié)論:
  1.Hh信號(hào)通路在AIA大鼠關(guān)節(jié)軟骨中明顯異?;罨⒚芮?/p>

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