益智聰明湯對(duì)記憶力減退模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的干預(yù)作用研究.pdf

1、目的：觀察以開竅化痰，醒神益智立法組方的中藥復(fù)方益智聰明湯對(duì)東莨菪堿模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，并對(duì)其相關(guān)作用機(jī)制作初步探討。
　　方法：選擇SD大鼠80只，雌雄各半，體重控制在180-220g，通過行為學(xué)試驗(yàn)（穿梭箱試驗(yàn)和 Morris水迷宮）篩選智力相當(dāng)，淘汰反應(yīng)過于遲鈍的大鼠，剩余70只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，西藥對(duì)照組，益智聰明湯低劑量組，益智聰明湯中劑量組、益智聰明湯高劑量組及中藥對(duì)照組7組?？瞻讓?duì)照組和模型對(duì)

2、照組大鼠給予生理鹽水灌胃（1ml/100g），西藥對(duì)照組用腦復(fù)康溶液（0.4g/kg）進(jìn)行灌胃，益智聰明湯低劑量組（10g/kg），益智聰明湯中劑量組（20g/kg）、模型益智聰明湯高劑量組（40g/kg）、中藥對(duì)照組（歸脾丸）（0.25g/kg），各組根據(jù)體重計(jì)算灌胃量，連續(xù)28天。在第23天開始增加造模與行為學(xué)試驗(yàn)，連續(xù)6天。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)前半小時(shí)，采用東莨菪堿注射，造成記憶障礙模型。模型對(duì)照組，西藥對(duì)照組，益智聰明湯低劑量組，益智聰明

3、湯中劑量組、益智聰明湯高劑量組及中藥對(duì)照組腹腔注射東莨菪堿注射液（2.0mg/kg），空白對(duì)照組注射相應(yīng)劑量生理鹽水，腹腔注射造模藥半小時(shí)后進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)測(cè)試(穿梭箱、Morris水迷宮)測(cè)定大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，第28天實(shí)驗(yàn)完成后取材（血、海馬組織）。用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清超氧化物歧化酶SOD含量、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px活性、丙二醛 MDA含量；qRT-PCR法檢測(cè)海馬組織的bax基因、bcl-2基因表達(dá)；免疫組化法檢測(cè)海馬組織

4、中的膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴據(jù)Morris水迷宮和穿梭箱實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組平均潛伏期比正常組明顯延長(zhǎng)（P＜0.05）；大鼠反應(yīng)遲鈍，被電擊時(shí)間明顯延長(zhǎng)（P＜0.05），提示記憶障礙模型成功。⑵治療后，益智聰明湯中、高劑量、西藥對(duì)照組平均潛伏期較模型對(duì)照組顯著減少，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。中藥對(duì)照組與模型對(duì)照組比較，平均潛伏期顯著減少，也有顯著性

5、差異（P＜0.05）。穿梭箱實(shí)驗(yàn)顯示，益智聰明湯中、高劑量組大鼠反應(yīng)活躍，與模型對(duì)照組比較，受電擊時(shí)間被動(dòng)逃避時(shí)間明顯減少，有顯著性差異（P＜0.05）。⑶與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組的大鼠血清中SOD含量降低（P＜0.05）， MDA的含量升高（P＜0.05），GSH-Px活性明顯降低，有顯著性差異（P＜0.05）；與模型對(duì)照組相比，益智聰明湯中、高劑量組大鼠血清中的SOD含量明顯提高（P＜0.05），MDA的含量降低（P＜0.05）

6、； GSH-Px活性明顯提高，有顯著性差異（ P＜0.05）。⑷與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組的大鼠海馬組織 Bax mRNA的表達(dá)顯著升高（P＜0.05），Bcl-2 mRNA的表達(dá)下降，有顯著性差異（P＜0.05）；與模型對(duì)照組相比，益智聰明湯中、高劑量組大鼠海馬組織Bax mRNA的表達(dá)顯著降低（P＜0.05），Bcl-2 mRNA的表達(dá)升高，有顯著性差異（P＜0.05）。⑸與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組的大鼠海馬組織 GFAP陽(yáng)性表

7、達(dá)升高（P＜0.05），BDNF陽(yáng)性表達(dá)降低，有顯著性差異（P＜0.05）；與模型對(duì)照組相比，益智聰明湯中、高劑量組大鼠海馬組織 GFAP陽(yáng)性表達(dá)降低（P＜0.05）， BDNF陽(yáng)性表達(dá)升高，有顯著性差異（ P＜0.05）。
　　結(jié)論：①用東莨菪堿注射法制造記憶障礙大鼠模型，其用藥后更接近模擬大鼠記憶障礙的表現(xiàn)狀態(tài)，是一種可靠的動(dòng)物模型。②益智聰明湯可以提高記憶障礙大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力，其作用機(jī)制可能與提高大鼠血清SOD含量，降低