香連化濁解毒方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠IFN-γ及MAPK-ERK信號通路表達影響的實驗研究.pdf

1、目的：通過觀察香連化濁解毒方對潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠一般情況、DAI評分、病理組織學(xué)改變以及IFN-γ和MAPK/ERK信號通路中ERK mRNA表達的影響，探討該方治療UC大鼠的作用機理，為本方的臨床應(yīng)用進一步提供理論和實驗基礎(chǔ)。
　　方法：60只健康雄性Wistar大鼠,體重200g-250g，按隨機數(shù)字表法分成6組：空白組（NG組）、模型組（MG組）、香連化濁解毒方低劑量組（LDG組）、香連化濁解毒方中劑量組（MDG組）、香連

2、化濁解毒方高劑量組（HDG組）、柳氮磺吡啶組（SASP組)，每組各10只。除NG組之外，其它的五組UC大鼠模型均采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)／乙醇溶液灌腸法制備，造模后的第3天，NG組大鼠正常喂養(yǎng)，MG組大鼠生理鹽水灌胃，其余各組予相應(yīng)的藥物灌胃，每日1次，連續(xù)治療2周后。觀察并記錄各大鼠體重、活動度、精神狀態(tài)、毛色光澤度、進食情況、糞便性狀等。計算各組 DAI評分，處死大鼠并解剖，觀察結(jié)腸黏膜的大體觀以及組織病理學(xué)的改變，

3、并對其進行組織損傷學(xué)評分，用RT-PCR法測定IFN-γ及ERK mRNA的表達。
　　結(jié)果：⑴與NG組相比,造模后各組大鼠均出現(xiàn)精神不振，被毛散亂，光澤度欠佳，活動減少，靈活度下降，進食減少，體重減輕，便稀或出現(xiàn)黏液血便。藥物治療2周后，HDG組一般情況與NG組相似，MDG組、SASP組改善均不及HDG組明顯，兩者一般情況無明顯區(qū)別，LDG組改善情況不及MDG組和SASP組，但較MG組好。DAI評分： MG組（2.50±0.47

4、）與HDG組（0.37±0.35）、MDG組（0.90±0.32）、LDG組（1.50±0.62）、SASP組（0.63±0.35）比較，各組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；HDG組與MDG組、LDG組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；HDG組與SASP組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；MDG組與SASP組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；LDG組與MDG組、SASP組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。⑵結(jié)腸黏膜：M

5、G組最差，HDG組與NG組相似，MDG組與SPAP組無明顯差別，較HDG組差但優(yōu)于LDG組。病理學(xué)觀察：與NG組相比，MG組僅可見少量結(jié)腸黏膜上皮細胞，有腺體缺失，毛細血管充血、水腫明顯，大量炎性細胞浸潤，糜爛、潰瘍形成。HDG組黏膜恢復(fù)后與NG組相似，MDG組、SASP組黏膜恢復(fù)不及HDG組但好于LDG組。組織損傷學(xué)評分：NG組(0.21±0.16)，顯著低于其他五組（P<0.05）；MG組（3.25±0.40）評分高于各治療組，差異

6、有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；HDG組（1.15±0.22）低于SASP組（1.52±0.34）、MDG組（1.55±0.29）和LDG組（2.92±0.25），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；SASP組低于MDG組，差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；MDG組低于LDG組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。⑶IFN-γmRNA：MG組（0.80±0.13）的 IFN-γ mRNA的表達高于NG組（0.23±0.04），差異有統(tǒng)計學(xué)意

7、義（P<0.05）；各治療組的 IFN-γmRNA的表達均低于 MG組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；HDG組（0.30±0.05）的IFN-γ mRNA表達低于SASP組（0.37±0.07）、MDG組（0.46±0.05）和LDG組（0.57±0.06），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；MDG組的IFN-γ mRNA表達低于LDG組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；SASP組的 IFN-γmRNA的表達低于 MDG組和 LD

8、G組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。ERK mRNA：MG組（0.27±0.02）的ERK mRNA的表達高于NG組（0.24±0.03），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；各治療組的ERK mRNA的表達均高于MG組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；HDG組（0.51±0.03）的ERK mRNA表達高于SASP組（0.48±0.02）、MDG組（0.47±0.02）、LDG組（0.40±0.03）,差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.0

9、5）；SASP組高于MDG組，差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；MDG組和 SASP組均高于 LDG組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：①香連化濁解毒方可有效改善 UC大鼠腹瀉及便血癥狀，可有效緩解其病理損傷，有助于保護 UC大鼠腸粘膜，且有一定量-效關(guān)系,中藥高劑量組的療效明顯好于中藥中劑量組和低劑量組，且優(yōu)于柳氮磺吡啶組。②香連化濁解毒方治療 UC的機理可能是通過下調(diào) IFN-γ水平、激活MAPK/ERK通路，