正加速度暴露影響大鼠實驗性胃潰瘍愈合的黏膜血流機制研究.pdf

1、消化性潰瘍主要指發(fā)生于胃和十二指腸的慢性潰瘍，其中胃潰瘍占整體的25％左右，它的發(fā)生和愈合是多種因素如胃酸的分泌、H.pyl-ori感染、胃腸肽的作用、藥物干預(yù)、遺傳因素、環(huán)境因素和精神因素等綜合作用的結(jié)果。有關(guān)飛行員疾病譜的研究表明，消化性潰瘍病是飛行人員中發(fā)病率和復(fù)發(fā)率較高的慢性病之一，這與飛行員暴露于高加速度、高低溫、低氧等特殊的工作環(huán)境，合并超強度的工作負荷和心理壓力的工作性質(zhì)有關(guān)。飛行員高空飛行時，必然會受到加速度的作用，加速

2、度條件下潰瘍極易發(fā)生出血、穿孔，對飛行安全造成威脅。其中，正加速度(Positive acceleration，+Gz)暴露時，飛行員受到方向由頭部指向足的慣性離心力作用，使器官變形、移位，血液發(fā)生慣性轉(zhuǎn)移和重新分布，同時會激發(fā)腎上腺系統(tǒng)而影響胃腸激素的分泌及炎癥介質(zhì)的釋放。本課題的前期實驗證明，+Gz條件下，大鼠胃黏膜中胃泌素、生長抑素、表皮生長因子及血液中前列腺素、降鈣素基因相關(guān)肽、一氧化氮等物質(zhì)的含量發(fā)生改變，從而加重胃黏膜損傷，

3、影響潰瘍的愈合，這為本實驗研究+ Gz暴露對大鼠實驗性胃潰瘍愈合的影響及相關(guān)胃黏膜血流機制的研究奠定了基礎(chǔ)。
　　本實驗通過乙酸燒灼法制備大鼠實驗性胃潰瘍模型，利用動物離心機模擬+ Gz暴露，研究不同+Gz暴露后實驗性胃潰瘍大鼠胃標(biāo)本的肉眼觀察特點、潰瘍周圍組織的病理特征、胃潰瘍的面積大小，檢測胃黏膜血流量(Gastric mucosal blood flow，GMBF)、胃黏膜中降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-

4、related peptide，CGRP)-mRNA及血清中一氧化氮(nitric oxide，NO)和內(nèi)皮素(endothelin，ET)的含量變化情況，探討不同+ Gz暴露對大鼠實驗性胃潰瘍愈合的影響及相關(guān)黏膜血流和可能的分子機制，為飛行員消化性潰瘍病的防治提供科學(xué)的理論依據(jù)。實驗中將40只雄性SD大鼠隨機分成5組，每組8只，分別標(biāo)記為A、B、C、D、E組，A組為正常對照組，B組為假手術(shù)組（僅麻醉后打開腹腔，不誘導(dǎo)潰瘍形成）、對C、

5、D、E組大鼠采用乙酸燒灼法建立胃潰瘍模型，造模3d后加速度處理大鼠，C組地面捆綁（相當(dāng)于+1 Gz恒速暴露）5 mins，D組+5 Gz值旋轉(zhuǎn)5 mins，E組+10Gz旋轉(zhuǎn)5 mins，隔日1次，共4次.1周后麻醉大鼠，進行取樣及檢測，檢測結(jié)果顯示:
　　1、不同+Gz暴露后實驗性胃潰瘍大鼠胃標(biāo)本肉眼觀察特點及病理特征
　　肉眼觀察+Gz暴露后大鼠胃組織特點，A、B組大鼠胃黏膜組織肉眼觀察光滑、完整;而C、D、E組大鼠胃竇

6、小彎側(cè)可見大小不等的潰瘍病灶，D、E組潰瘍表面覆有白苔，且E組胃黏膜伴有糜爛。然后對相應(yīng)各組大鼠胃潰瘍周圍組織標(biāo)本按常規(guī)方法制備病理切片，光鏡下觀察胃組織的病理特征，除A、B組無異常外，其余各組大鼠均有大量炎癥細胞浸潤，胃黏膜變薄、腺體數(shù)目減少等表現(xiàn)，予+Gz處理后，D組腺體排列不規(guī)則伴明顯擴張，且E組表現(xiàn)程度較D組更嚴重，結(jié)果說明+ Gz暴露會加重胃粘膜炎癥反應(yīng)及粘膜損傷，隨著+Gz值的增加損害程度更為顯著。
　　2、不同+Gz

7、暴露對大鼠實驗性胃潰瘍面積大小的影響
　　用游標(biāo)卡尺測量潰瘍面積大小，A、B組無潰瘍形成，與C組相比，D、E組潰瘍面積明顯增大(P＜0.01)，且隨著+Gz值的升高E組潰瘍面積更大，與D組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，結(jié)果顯示，隨著+Gz值的增大，潰瘍面積越大，這與上述肉眼觀察及病理特征結(jié)果相一致，共同說明了持續(xù)反復(fù)+Gz暴露會加重大鼠胃黏膜損害，導(dǎo)致潰瘍愈合延遲，且損傷程度與暴露+Gz值有關(guān)。
　　3、不同+Gz

8、暴露對實驗性胃潰瘍大鼠GMBF的影響及其與潰瘍面積的相關(guān)性
　　用MoorVMS-LDF2型激光多譜勒血流儀測定GMBF的大小，A組與B組相比無明顯差異，造模后的C組GMBF較B組明顯降低(P＜0.01)，受加速度暴露后的D、E組GMBF顯著低于C組(P＜0.01)，且E組GMBF較D組降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。本實驗對大鼠胃潰瘍面積大小和GMBF量的相關(guān)性進行了統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果顯示二者存在明顯負相關(guān)關(guān)系（r=-0.

9、928，P＜0.05）。表明+Gz暴露會導(dǎo)致GMBF降低，+Gz條件下GMBF量的變化與模型大鼠的潰瘍愈合密切相關(guān)。
　　4、不同+Gz暴露對實驗性胃潰瘍大鼠胃黏膜CGRP-mRNA表達的影響
　　用RT-PCR的方法檢測胃黏膜中CGRP-mRNA的含量變化情況，結(jié)果由相對定量2-ΔΔCT表示，B組與A組相比無明顯差異，與B組比較，造模后的C組胃粘膜CGRP-mRNA含量明顯升高(P＜0.01)，而+Gz處理后，D、E組較C

10、組則明顯降低(P＜0.01)，且E組下降更顯著(P＜0.01)。說明+ Gz暴露可導(dǎo)致黏膜中CGRPmRNA含量的減少，這可能是+Gz條件下粘膜血流量降低及胃粘膜保護作用減弱的原因之一，從而影響潰瘍的愈合。
　　5、不同+Gz暴露對實驗性胃潰瘍大鼠血清中NO、ET含量的影響
　　硝酸還原酶法測定血清中NO的含量，用放射免疫法測定血清中ET的含量。A組血清中NO、ET與B組NO、ET比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，造模后的C組與B組相比

11、，NO含量減少，而ET含量升高(P＜0.01)，而+Gz處理后，與C組比較，D組NO明顯升高(P＜0.01)，ET降低(P＜0.05)，E組與D組比較，NO含量下降，對應(yīng)ET含量升高，差異顯著(P＜0.01)。結(jié)果顯示，+Gz暴露后血清中NO、ET的含量發(fā)生不同規(guī)律性的變化，但二者的變化趨勢對機體產(chǎn)生的效應(yīng)與上述CGRPmRNA含量的變化相對一致，CGRP、NO、ET三者是較強的血管活性物質(zhì)，實驗中+Gz處理后大鼠胃黏膜血流量明顯降低，

12、考慮可能與+Gz作用下三者含量的變化及相互作用密切相關(guān)。
　　綜上所述，+Gz會導(dǎo)致潰瘍愈合延遲，影響潰瘍愈合的質(zhì)量，且低劑量+Gz作用時對機體的影響較小，隨著+Gz值的增加，對潰瘍愈合的影響越大，其機制考慮與+Gz作用下胃黏膜血流量的減少，黏膜CGRP-mRNA含量降低及血清中NO、ET的含量變化有關(guān)。這為飛行員消化性潰瘍的治療從血供方面提供理論依據(jù)，給臨床工作者以新的啟示，對于潰瘍病飛行員，在常規(guī)用藥的同時，可考慮應(yīng)用增加胃黏