抗HBV黃酮類藥物篩選及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、乙型肝炎病毒（HBV）是一種導(dǎo)致乙型肝炎及其它相關(guān)病癥的一種病毒，目前臨床抗HBV藥物有多種缺陷，無法徹底治愈HBV導(dǎo)致的慢性肝炎等癥狀。本論文是在 HepG2和 HepAD38細(xì)胞水平上研究黃酮類化合物(Flavonoids)和菊花不同部位提取物對HBV的作用，同時尋找這些化合物和提取物對HBV作用的效果以及作用機(jī)制。
　　本論文中，采用MTT分析法確定藥物的細(xì)胞毒性作用，選取藥物安全濃度范圍，利用HepG2或HepAD38細(xì)胞

2、為研究模型，在細(xì)胞水平上，分別研究107種黃酮化合物及野菊花和太行菊提取物對HBV的抗原抑制、mRNA產(chǎn)生、啟動子報告基因表達(dá)的影響。
　　MTT分析結(jié)果顯示在所測試的濃度范圍，107種黃酮類化合物對細(xì)胞本身沒有毒性。酶聯(lián)免疫反應(yīng)(ELISA)法檢測得到3、12、21、22、36、44、46、75、81等9種黃酮類化合物能夠在初篩和復(fù)篩中較好抑制HepG2或HepAD38細(xì)胞中HBsAg、HBeAg的產(chǎn)生。熒光素酶報告基因檢測結(jié)果

3、發(fā)現(xiàn)44、46號化合物能夠顯著性降低HBV SP1和SP2這兩個啟動子，對HBV的轉(zhuǎn)錄有一定影響。
　　MTT實驗結(jié)果顯示幾種菊花提取物能夠在測試的低濃度下對細(xì)胞無毒害，ELISA結(jié)果表明太行菊莖提取物在1μg/ml時能夠在第48 h、96 h時顯著降低HBsAg和HBeAg，而野菊花莖提取物在1μg/ml時僅48 h降低HBsAg和HBeAg；太行菊花提取物能夠在0.1μg/ml時達(dá)到野菊花花提取物1μg/ml時的表現(xiàn)。熒光素酶