氟喹諾酮類藥物核酸適配體的篩選研究.pdf

1、核酸適配體可以特異性結(jié)合蛋白質(zhì)、氨基酸、核苷酸、多肽、藥物、維生素和其他有機或無機化合物。它是通過指數(shù)富集的配基系統(tǒng)進化技術(shù)（Systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX）在體外篩選出來的寡聚核苷酸片段，由于其對靶標(biāo)物質(zhì)具有強特異性和高親和力，現(xiàn)在核酸適配體作為生物探針或生物傳感器元件廣泛用于分析檢測中。
　　氟喹諾酮類藥物（Fluoroquinol

2、ones，F(xiàn)QNs）屬第3代喹諾酮類抗菌藥，是一類人工合成的廣譜抗菌藥。FQNs最早用于治療人類的各種感染癥，由于FQNs價格低廉且易獲得，現(xiàn)在FQNs也被用于畜禽養(yǎng)殖和水產(chǎn)品養(yǎng)殖業(yè)，在經(jīng)濟利益的驅(qū)使下，部分養(yǎng)殖戶違規(guī)使用FQNs，導(dǎo)致了大量耐藥菌株的產(chǎn)生，且FQNs進入動物體內(nèi)之后能迅速從血液擴散到組織中，可以高濃度殘留，長期食用后，可在體內(nèi)形成積累性殘留，進而誘發(fā)人體的不良反應(yīng)，具有潛在的致癌性。目前FQNs的高親和力核酸適配體仍然

3、很少，急需開發(fā)新技術(shù)用于高效率的篩選核酸適配體。本論文建立了毛細管電泳（Capillary electrophoresis，CE）法和局域表面等離子共振（Localized surface plasmon resonance，LSPR）法來篩選氟喹諾酮類藥物的核酸適配體。本論文分為以下幾個部分：
　　1．介紹了核酸適配體的概念、SELEX的原理、SELEX的分離方法、CE和LSPR的工作原理和特點，以及論文的研究意義和內(nèi)容。

4、>　　2．建立了CE篩選環(huán)丙沙星核酸適配體的方法，對運行緩沖液的選擇和條件的優(yōu)化之后，經(jīng)過CE進行收集和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase chain reaction，PCR）的擴增，3輪篩選得到了2條環(huán)丙沙星的核酸適配體。
　　3．建立了LSPR篩選環(huán)丙沙星核酸適配體的方法，運用固定靶標(biāo)的方法，將環(huán)丙沙星固定在氨基納米金芯片上，通過PCR擴增納米金芯片上與環(huán)丙沙星結(jié)合的核酸分子，5輪篩選得到了3條環(huán)丙沙星的核酸適配體。