G蛋白β2亞基調(diào)節(jié)線粒體融合.pdf

1、線粒體是一個(gè)處于動(dòng)態(tài)融合與分裂的變化的細(xì)胞器，其融合與分裂對(duì)其生理功能起著非常重要的作用。其中Mfn1蛋白是介導(dǎo)調(diào)控線粒體融合的重要分子之一。目前關(guān)于Mfn1在介導(dǎo)線粒體融合時(shí)，如何被調(diào)控尚不完全清楚，本研究對(duì)Gβ2蛋白通過Mfn1調(diào)控線粒體融合的分子機(jī)制作初步探討。
　　 我們通過酵母雙雜交技術(shù)，成功利用Mfn1蛋白的241-387氨基酸序列，從胎肝文庫中發(fā)現(xiàn)一靶蛋白--Gβ2蛋白。Gβ2蛋白是異源三聚體G蛋白β亞基家族的同源

2、異構(gòu)體之一，它可以與Gγ亞基組成二聚體或直接以單體的形式在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮作用。我們實(shí)驗(yàn)室通過免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Gβ2蛋白和Mfh1蛋白在細(xì)胞內(nèi)可以發(fā)生直接的相互作用，這表明Gβ2蛋白和調(diào)節(jié)線粒體融合相關(guān)。目前除了傳導(dǎo)信號(hào)外，關(guān)于Gβ2蛋白如何調(diào)控線粒體融合機(jī)制尚不清楚。
　　 我們首先采用免疫熒光和細(xì)胞組分分離的方法證明，Gβ2蛋白部分定位于線粒體上。Gβ2蛋白能夠影響線粒體的形態(tài)，在外源表達(dá)Gβ2蛋白時(shí)，細(xì)胞的線粒

3、體發(fā)生聚集；而Gβ2敲減的細(xì)胞中，線粒體形態(tài)破碎成短管狀和小球狀，此系統(tǒng)再恢復(fù)Gβ2蛋白的表達(dá)則可以恢復(fù)線粒體的網(wǎng)絡(luò)形態(tài)。此外，在Mfn1敲除的MEF細(xì)胞中恢復(fù)表達(dá)Gβ2蛋白并不能恢復(fù)線粒體的形態(tài)。
　　 Gβ2蛋白高表達(dá)的細(xì)胞中線粒體聚集在核周，提示線粒體可能沿著微管進(jìn)行了負(fù)向的運(yùn)動(dòng)。因此我們也觀察了Gβ2蛋白對(duì)微管的影響。在Gβ2蛋白敲減的細(xì)胞中，觀察到微管的異常的排列。免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也證明Gβ2蛋白和微管會(huì)發(fā)生相互作