微生物來源的抗肺炎克雷伯菌活性菌株篩選及次級代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、革蘭氏陰性菌的耐藥問題是臨床抗感染治療的一大憂患，近年由于各類抗生素的濫用，導(dǎo)致耐藥菌株不斷出現(xiàn)，耐藥性不斷增強。然而，自上世紀80年代以來，獲準上市的新抗菌藥物數(shù)量卻在逐年減少，同時近年上市的新藥在針對革蘭氏陰性耐藥菌感染方面未有明顯進展。肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae（KPN）是重要的革蘭氏陰性菌耐藥病原菌，在革蘭氏陰性菌臨床分離檢出率中位居第二，并且近10年它已成為耐藥增長速率最快的腸桿菌科病原菌之一。因此

2、研發(fā)新的抗革蘭氏陰性菌的抗生素，對解決日益增長的肺炎克雷伯菌耐藥問題具有重要意義。
　　微生物次級代謝產(chǎn)物是尋找新藥的重要來源，其種類多樣并且包含豐富的代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)類型，這些特性都為發(fā)現(xiàn)新的抗耐藥菌化合物提供了可能。
　　本研究以一株產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶SHV-18的肺炎克雷伯菌(ATCC700603)抑制活性為導(dǎo)向，對本實驗室的16700株微生物（包括放線菌、細菌、真菌）的33400個發(fā)酵液樣品進行活性篩選，利用微量稀釋法

3、測定其抗肺炎克雷伯菌( ATCC700603)的活性，初篩共得到93株活性菌株的101個活性發(fā)酵液樣品，初篩活性菌株陽性率為0.56％。對93株活性菌株進行復(fù)篩二次發(fā)酵，采用平板紙片法進行活性測定，復(fù)篩后共得到32株活性菌株的36個活性發(fā)酵液樣品，復(fù)篩活性菌株陽性率為0.20％。對其中活性較好的17個發(fā)酵液樣品進一步進行抗菌譜測定，發(fā)現(xiàn)有4個發(fā)酵液樣品I09AA-02146、I09AA-02711、I11AB-02500、I11AB-0

4、2762對大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌，鮑曼不動桿菌等革蘭氏陰性病原菌的標準菌株以及耐藥菌株均表現(xiàn)出良好的抑制活性。因樣品I11AB-02500的活性較強，發(fā)酵活性重復(fù)性好且對產(chǎn)NDM-1的肺炎克雷伯桿菌ATCC BAA-2146具有良好的抑制作用，因此將菌株I11A-02500(CPCC203718)作為本研究中活性化合物研究的陽性菌株。
　　本研究對I11A-02500進行放大發(fā)酵，并對其進行了初步的次級代謝產(chǎn)物研究