海洋放線菌B5菌株發(fā)酵液中抑菌活性成分研究.pdf

1、本項(xiàng)研究以山東威海淺海海水中分離得到的放線菌B5菌株為研究對(duì)象，對(duì)該菌株的分類地位、發(fā)酵產(chǎn)物的抑菌活性、穩(wěn)定性及其抑菌成分的初步分離進(jìn)行了研究，主要結(jié)果如下： (1)經(jīng)經(jīng)典分類法初步鑒定，B5菌株的培養(yǎng)特征和生理生化特性方面與Streptomyces albus 16d-Ⅱ相似，但存在一定的差異，初步鑒定B5菌株為鏈霉菌屬白孢類群中16d-Ⅱ白色鏈霉菌(S．a(chǎn)lbus 16d-Ⅱ)的一個(gè)變種。 (2)采用抑制菌絲生長(zhǎng)速率

2、法的測(cè)定結(jié)果表明B5菌株發(fā)酵液對(duì)西瓜枯萎病菌、小麥赤霉病菌、玉米大斑病菌、南瓜枯萎病菌、蘋果輪紋病菌、棉花枯萎病菌、煙草赤星病菌和番茄灰霉病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率在90％以上；對(duì)番茄早疫病、辣椒疫霉病菌、玉米小斑病菌、小麥根腐病菌和蘋果炭疽病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率在80％以上，對(duì)馬鈴薯干腐病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率在75％左右。管碟法生測(cè)結(jié)果表明B5菌株發(fā)酵液對(duì)枯草芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌具有明顯的抑制作用，其抑菌圈直徑分別為

3、23mm、21mm、24mm和18mm。盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，B5菌株發(fā)酵液對(duì)小麥白粉病的保護(hù)和治療作用分別為76.03％和73.30％，發(fā)酵液稀釋10倍后對(duì)小麥白粉病保護(hù)和治療作用分別為43.58％和41.06％。 (3)B5菌株連續(xù)傳代10代，其發(fā)酵液對(duì)病原細(xì)菌的抑菌圈直徑?jīng)]有發(fā)生明顯的變化，表明B5菌株具有較高的遺傳穩(wěn)定性。B5菌株發(fā)酵液活性成分在熱和酸性條件下穩(wěn)定性較強(qiáng)，但在堿性條件下很敏感。常溫下，pH2條件下處理30mi

4、n其發(fā)酵液活性和原始發(fā)酵液相當(dāng)；但在pH10條件下處理1h抑菌圈直徑明顯減小，pH>12處理6h其活性基本喪失。 (4)采用離子交換柱層析及制備HLPC技術(shù)從其發(fā)酵液分離得到兩個(gè)活性成分3＃，5＃；3＃樣品經(jīng)波譜等鑒定為鏈絲菌素類streptothricins D衍生物，與AN-201 Ⅱ是同一個(gè)化合物；由于5＃樣品太少而未做鑒定。采用濾紙片法測(cè)定3?；衔飳?duì)枯草芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的MIC分別為60