用于血管性癡呆的苗藥新藥萸姜貼劑的研制.pdf

1、目的:將邱教授用于治療血管性癡呆(VD)的臨床經(jīng)驗方研制開發(fā)為使用方便、利于吸收的苗藥新藥萸姜外用貼劑，且初步探討其對VD的藥效作用。
　　方法:
　　1.工藝研究。提取工藝:以君藥吳茱萸中吳茱萸堿和吳茱萸次堿的總轉(zhuǎn)移率為指標(biāo)，結(jié)合抗動物腦缺血的藥效學(xué)評價，采用單因素考察和Lg(3)4正交設(shè)計優(yōu)選最佳的提取工藝。純化工藝:運(yùn)用高效液相色譜(HPLC)法檢測吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量，以吸附量和洗脫量為評價指標(biāo)，確定大孔吸附樹

2、脂的類型;通過考察吳茱萸堿、吳茱萸次堿的總泄漏量，確定最佳的上樣量;以洗脫量為考察指標(biāo)，結(jié)合抗動物腦缺血的藥效學(xué)評價，確定最佳的洗脫溶劑;通過考察不同上樣濃度下的吸附量、比吸附量，確定最佳的上樣濃度。成型工藝研究:以貼劑的外觀性狀總評分為指標(biāo)，采用單因素考察和L9(3)4正交設(shè)計優(yōu)選最佳基質(zhì)配方。
　　2.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究。以吳茱萸堿和吳茱萸次堿為對照品，采用高效液相色譜法分別建立吳茱萸堿和吳茱萸次堿含量測定方法并進(jìn)行方法學(xué)研究。采

3、用薄層色譜法(LTC)分別建立貼劑中吳茱萸、大果木姜子油、見血飛和艾片的鑒別方法。
　　3.初步藥效學(xué)研究。分別采用雙頸動脈反復(fù)夾閉法制成腦缺血再灌注小鼠模型，線栓法制成局灶性腦缺血再灌大鼠模型。采用跳臺法和避暗箱法測各組動物的學(xué)習(xí)記憶能力，并采用分光光度法檢測腦組織中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰膽堿(Ach)、乙酰膽堿酯酶(AchE)的含量。
　　結(jié)果:
　　1.優(yōu)選出最佳提取工藝為10倍量70％

4、乙醇回流提取3次，每次1h。最佳純化樹脂類型為D101型，最佳的純化工藝為藥材量∶樹脂量(1∶1)上樣，分別用30％乙醇和70％乙醇洗脫，上樣濃度為0.5g生藥/ml。最佳基質(zhì)配方:聚乙二醇2000(PEG2000)0.4g，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)1.2g，凡士林0.2g，甘油0.4g。且所制備的貼劑均勻度、粘性和皮膚隨性均好。
　　2.建立了貼劑的HPLC含量測定方法:色譜柱為C18柱，流動相為[乙腈:（水∶四氫呋喃∶磷酸）(

5、50∶1∶0.2)][43∶57]，檢測波長為225nm，柱溫為30℃，流速為1.0ml/min。進(jìn)行方法學(xué)驗證發(fā)現(xiàn)，所建立的含量測定方法和薄層鑒別方法穩(wěn)定、可行，重現(xiàn)性好，可用于貼劑的質(zhì)量控制。
　　3.和正常組比較，在跳臺實驗和避暗實驗中，模型組小鼠被電擊的潛伏時間和錯誤次數(shù)均有顯著性差異，大鼠避暗箱潛伏時間和錯誤次數(shù)也都有顯著性影響，模型組大鼠腦組織中NO明顯增加，SOD明顯降低，Ach含量明顯降低，AchE含量明顯增加;和